北京百奧萊博供應(yīng)的Ki67細(xì)胞增殖檢測試劑盒用于科研目的，我公司的Ki67細(xì)胞增殖檢測試劑盒品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括Ki67細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：Ki67細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)
英文名稱：Ki67 cell proliferation Detection Kit
產(chǎn)品貨號：KFS336
產(chǎn)品規(guī)格：20T

Ki67 蛋白是細(xì)胞周期相關(guān)的一種核蛋白，主要表達(dá)于細(xì)胞增殖分裂的各個(gè)時(shí)期（G1、S、G2 和M 期），但是在靜息的細(xì)胞（G0 期）中不表達(dá)。Ki67 常用于檢測腫瘤細(xì)胞的生長指數(shù)（免疫組化法利用計(jì)算細(xì)胞總數(shù)中的Ki67 陽性細(xì)胞數(shù)所占比例得到Ki67 指數(shù)）。

Ki67 通常通過標(biāo)記抗Ki67 的抗體（FITC 綠色熒光）和DNA 染料碘化丙啶（PI，紅色）而利用流式細(xì)胞儀檢測來實(shí)現(xiàn)對細(xì)胞周期的檢測。

操作方法
1. 在zuì適的環(huán)境下培養(yǎng)細(xì)胞。
2. 除去培養(yǎng)液，用PBS 洗一次。
3. 胰蛋白酶處理和收集細(xì)胞，離心，（注意1）保證每管細(xì)胞數(shù)在106 個(gè)。
4. 用0.3 ml PBS 輕輕的重懸細(xì)胞, 然后慢慢加入0.7 ml 預(yù)冷的乙醇。用1 ml 玻璃移液管小心的混勻。在4°C 至少1h。（注意2）
5. 沉淀細(xì)胞，完全吸去上清。
6. 用150 μl PBS/1 % BSA 洗細(xì)胞2 次。
7. 用100μl 抗體孵育液（0.5% Tween-20/1%BSA/PBS）重懸細(xì)胞，加入1ul Ki67 抗體(1μg/106 cells)，室溫孵育1 小時(shí)。
8. 離心收集細(xì)胞，用150μl1% BSA-PBS 洗2 次。
9. 離心收集細(xì)胞，用50μl 抗體孵育液重懸，加1μl (1.5μg/106 cells) 羊抗鼠IgG-FITC，室溫孵育30 分鐘。離心收集細(xì)胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次。
10. 用含有終濃度為10 μg/ml RNase A 和20μg/ml PI 的0.5 ml PBS（pH7.4）重懸細(xì)胞。
11. 避光使細(xì)胞在室溫下孵育20min 后，離心收集細(xì)胞，150μl PBS/ 1 % BSA 洗2 次后，轉(zhuǎn)移至流式檢測管中重懸。
12. FACS 檢測或者儲(chǔ)存于4℃。

根據(jù)您的關(guān)注的Ki67細(xì)胞增殖檢測試劑盒(ICF/FACS法)，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：

貨號	名稱	規(guī)格
YT128	增強(qiáng)型CCK-8試劑盒	100次|500次|2500次|10000次
YT138	Caspase 1 活性檢測試劑盒	20次|100次
YT142	Caspase 6 活性檢測試劑盒	20次|100次
YT148	線粒體膜電位檢測試劑盒	>100次
SNM511	Caspase-8活性檢測試劑盒(分光光度法)	100T|50T|20T
SY0481	地塞米松溶液(10mM in DMSO)	25mg

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名稱：中性紅細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
貨號：YT124
規(guī)格：500次
本試劑盒是一種基于細(xì)胞對于中性紅的攝入能力來檢測細(xì)胞增殖或細(xì)胞毒性的試劑盒。中性紅可以被活細(xì)胞所攝入，并在溶酶體中積累。在細(xì)胞增殖加快時(shí)，細(xì)胞數(shù)量增多，可以攝入的中性紅的量就會(huì)增加。在細(xì)胞受到損傷時(shí)，中性紅的攝入能力會(huì)下降。這樣通過對于中性紅攝入量的不同就可以確定細(xì)胞的增殖或毒性情況。中性紅同時(shí)也是一種pH指示劑，在酸性時(shí)呈紅色，在pH6.8升至pH8.0時(shí)由紅色逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。細(xì)胞核中的核酸呈酸性，因此細(xì)胞核會(huì)被染成紅色。由于溶酶體(lysome)中也是酸性環(huán)境，因此溶酶體也可以被中性紅染色液染成紅色。本試劑盒可以用于檢測500個(gè)樣品。

試劑盒組份：
中性紅染色液————————10ml
中性紅檢測裂解液——————100ml

注意事項(xiàng)：
1. 需準(zhǔn)備一臺(tái)可以測定A540的酶標(biāo)儀或微量分光光度計(jì)。
2. 次使用本試劑盒時(shí)建議先取少量樣品做好預(yù)實(shí)驗(yàn)。

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期一年。

名稱：一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(紅色熒光)
貨號：YT136
規(guī)格：20次|50次
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細(xì)胞凋亡檢測方法。對于經(jīng)過固定和洗滌的細(xì)胞或組織，只要經(jīng)過一步染色反應(yīng)，洗滌后就可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測到呈現(xiàn)紅色熒光的凋亡細(xì)胞。本試劑盒足夠檢測20個(gè)樣品。

試劑盒組分：
TdT酶—————————40μl
熒光標(biāo)記液——————960μl
TdT酶稀釋液(選用)———00μl

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder?；蚪MDNA斷裂時(shí)，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl
Transferase,TdT)的催化下加上紅色熒光探針Cy3(Cyanine 3)標(biāo)記的dUTP，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細(xì)胞凋亡的原理。

本試劑盒有如下優(yōu)點(diǎn)：
(1)高靈敏度：背景染色低，陽性染色明亮，可以在單細(xì)胞水平檢測到細(xì)胞凋亡，同時(shí)由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細(xì)胞凋亡。
(2)特異性：TUNEL檢測時(shí)通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞，而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞。
(3)快速：僅需約1-2個(gè)小時(shí)即可完成。
(4)方便：只需一步染色反應(yīng)，洗滌后即可觀察，不必使用二抗等進(jìn)行多步操作。
(5)應(yīng)用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。

TUNEL法特異性檢測細(xì)胞凋亡時(shí)產(chǎn)生的DNA斷裂，但不會(huì)檢測出射線等誘導(dǎo)的DNA斷裂(和細(xì)胞凋亡時(shí)的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開，另一方面也不會(huì)把射線等誘導(dǎo)發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細(xì)胞判斷為凋亡細(xì)胞。

少數(shù)細(xì)胞凋亡時(shí)沒有DNA斷裂，此時(shí)不適用TUNEL法檢測。在個(gè)別類型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴(yán)格判斷細(xì)胞凋亡的情況下，zuì好同時(shí)檢測多個(gè)凋亡指標(biāo)。

注意事項(xiàng)：
1. 需自備用于洗滌細(xì)胞的PBS或HBSS，用于封片的抗熒光淬滅封片液(YT097)，用于固定的4%多聚甲醛或向百奧萊博訂購免疫染色固定液(YT086)，同時(shí)需自備含0.1% Triton X-100的PBS或向百奧萊博訂購免疫染色洗滌液(YT089)。
2. 如果用于石蠟切片的檢測，需自備蛋白酶K，二甲苯。

儲(chǔ)存條件：-20℃。

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