HR0344-50T BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒

BCIP/NBT 堿性磷酸酯酶顯色試劑盒是一種用于免疫組化顯色、Western等膜顯色和誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞iPS 鑒定等的試劑盒。BCIP/NBT 是堿性磷酸酯酶的常用底物。在堿性磷酸酯酶的催化下,BCIP會(huì)被水解產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物,該產(chǎn)物會(huì)和NBT 發(fā)生反應(yīng),形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色的NBT-formazan。...
使用方法:
1、對于組織切片或細(xì)胞樣品或膜,在與堿性磷酸酯酶標(biāo)記的抗體或其它形式的探針孵育后,用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5 次,每次3-5分鐘。對于檢測內(nèi)源性堿性磷酸酯酶的組織或細(xì)胞樣品,在適當(dāng)固定后,也用適當(dāng)洗滌液洗滌3-5 次,每次3-5分鐘。
2、按照如下比例依次加入各溶液,混勻后即配制成BCIP/NBT 染色工作液:
堿性磷酸酯酶顯色緩沖液 |
3mL |
10mL |
BCIP溶液 |
10μL |
33μL |
NBT溶液 |
20μL |
66μL |
工作液 |
3.03mL |
10.1mL |
3、最后一次洗滌完畢后,去除洗滌液,加入適量BCIP/NBT 染色工作液,確保能充分覆蓋樣品。
4、室溫避光孵育5-30分鐘或更長時(shí)間(可長達(dá)24小時(shí)),直至顯色至預(yù)期深淺。
5、去除BCIP/NBT染色工作液,用蒸餾水洗滌1-2 次即可終止顯色反應(yīng)。
6、對于組織切片或細(xì)胞樣品,顯色反應(yīng)終止后,如有必要可以用中性紅染色液染色,以便于觀察。對于膜,顯色反應(yīng)終止后,可以室溫晾干避光保存。
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