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生物樣品的采集制備和預(yù)處理
發(fā)布時(shí)間:2017-11-08瀏覽次數(shù):1127返回列表
一、生物樣品采集
1、植物樣品的采集
( 1 )采集的植物樣品要具有代表性、典型性、適時(shí)性。
( 2 )布點(diǎn)方法
常采用梅花形五點(diǎn)取樣法或交叉間隔取樣法。
( 3 )采樣方法
①采樣前應(yīng)預(yù)先準(zhǔn)備好采樣工具。
②根據(jù)實(shí)際情況確定樣品采樣量。
③選擇種植物在采樣區(qū)內(nèi)按梅花形五點(diǎn)或交叉間隔取樣方式采集 5 - 10 處的植株混合組成一個(gè)代表樣品。
④將采好的樣品裝入布口袋或聚乙烯塑料袋中,貼好標(biāo)簽,并填寫采樣登記表。
2、動(dòng)物樣品的采集
( 1 )尿的采集
定性檢測(cè)尿液成分時(shí)應(yīng)采集晨尿。
定量檢測(cè)尿液成分時(shí)一般采集 24h 總排尿量。
( 2 )血液的采集
一般用注射器抽取 10mL 血樣冷藏備用。常用于分析血液中所含金屬毒物及非金屬毒物。
( 3 )毛發(fā)和指甲的采集
采集和保存較為方便,主要用于汞、砷等含量的測(cè)定。
( 4 )組織和臟器采集
二、生物樣品的制備
對(duì)于液體狀態(tài)的動(dòng)物樣品常無(wú)需制備,對(duì)動(dòng)物組織和臟器主要是采用搗碎的方法制成漿狀鮮樣備用,而對(duì)植物樣常根據(jù)不同情況,利用不同方式進(jìn)行樣品制備。
植物樣品的制備
(一)平均樣的獲得
四分法、切成塊的 1/4 - 1/8 混合
(二)分析試樣的制備
1 、鮮樣
2 、風(fēng)干樣: 60 - 70 攝氏度低溫真空干燥箱中烘干(勻漿、小片)
3 、水分含量測(cè)定( 100 - 105 攝氏度烘干 / 真空干燥 / 低溫烘干)
三、生物樣品的預(yù)處理
常用的預(yù)處理方法有濕法消解法、灰化法、提取、分離和濃縮法等。
1、濕化消解法
利用強(qiáng)酸等與生物樣品共同煮沸,將樣品中有機(jī)物分解成二氧化碳和水除去。
常用的消解試劑體系有濃硝酸-高氯酸、濃硝酸-濃硫酸、濃硫酸-過氧化氫等。
2、灰化法
利用坩堝或氧燃燒ping,使樣品在高溫條件下分解,并用適當(dāng)?shù)娜芤喝芙饣蛭辗纸猱a(chǎn)物,制成分析試液。
3、提取法
整個(gè)過程包括提取、分離、濃縮三個(gè)步驟。
( 1 )提取
應(yīng)根據(jù)樣品的特點(diǎn)、待測(cè)組分的性質(zhì)、存在形態(tài)和數(shù)量、以及分析方法等因素選擇,常用方法有:
1 、振蕩提取法
2 、組織搗碎提取法
3 、脂肪提取器提取
4 、直接球磨提取法
( 2 )分離
用提取劑從生物樣品中提取欲測(cè)組分的同時(shí),不可避免的會(huì)將其他相關(guān)組分提取出來,因此,在測(cè)定之前,還必須將上述雜質(zhì)分離出去。常用的分離方法有:液-液萃取法、層析法、磺化法、低溫冷凍法、吹蒸法、液上空間法等。
( 3 )濃縮
當(dāng)生物樣品的提取液經(jīng)過分離凈化后,其中的污染物濃度往往仍達(dá)不到分析方法的要求,需要進(jìn)行濃縮和富集,常用方法有:蒸餾或減壓蒸餾法、 K-D 濃縮器濃縮法、蒸發(fā)法、真空冷凍干燥法等。