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752分光光度計的原理和使用方法
發(fā)布時間:2018-03-23瀏覽次數(shù):1380返回列表
752分光光度計具有自動化程度高,功能多,可塑性強等特點,在生化分析,生命科學研究,特別是DNA分析定量方面可發(fā)揮重要的作用。
752分光光度計的原理:
752分光光度計由光源室、單色器、樣品室、光電管暗盒、電子系統(tǒng)及數(shù)字顯示器等部件組成,儀器內部光路系統(tǒng)。從鎢燈或氫燈發(fā)出的連續(xù)輻射經(jīng)濾色片選擇聚光鏡聚光后投向單色器進狹縫,此狹縫正好位 于聚光鏡及單色器內準直鏡的焦平面上,因此進入單色器的復合光通過平面反射鏡反射及準 直鏡變成平行光射向色散光柵。光柵將入射的復合光通過衍射作用形成按照一定順序均勻排 列的連續(xù)單色光譜,此時單色光譜重新返回到準直鏡,然后通過聚光原理成像在出射狹縫上 。出射狹縫選出帶寬的單色光通過聚光鏡落在試樣室被測樣品中心,樣品吸收后透射的 光經(jīng)光門射向光電管陰面。根據(jù)光電效應原理,會產(chǎn)生一股微弱的光電流。
752分光光度計的使用方法:
(1) 將靈敏度旋鈕調到“1”檔(放大倍數(shù)?。?。
(2) 打開電源開關,鎢燈點亮,預熱30min即可測定。若需用紫外光則打開“氫燈”開關,再按氫燈觸發(fā)按鈕,氫燈點亮,預熱30min后使用。
(3) 將選擇開關置于“T”。
(4) 打開試樣室蓋,調節(jié)0%旋鈕,使數(shù)字顯示為“0.000”。
(5) 調節(jié)波長旋鈕,選擇所需測的波長。
(6) 將裝有參比溶液和被測溶液的比色皿放入比色皿架中。
(7) 蓋上樣品室蓋,使光路通過參比溶液比色皿,調節(jié)透光率旋鈕,使數(shù)字顯示為100.0%(T)。如果顯示不到100.0%(T),可適當增加靈敏度的檔數(shù)。然后將被測溶液置于光路中,數(shù)字顯示值即為被測溶液的透光率。
(8) 若不需測透光率,儀器顯示100.0%(T)后,將選擇開關調至“A”,調節(jié)吸光度旋鈕,使數(shù)字顯示為“000.0”。再將被測溶液置于光路后,數(shù)字顯示值即為溶液的吸光度。
(9) 若將選擇開關調至“C”,將已知標定濃度的溶液置于光路,調節(jié)濃度旋鈕使數(shù)字顯示為標定值,再將被測溶液置于光路,則可顯示出相應的濃度值。