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人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒說(shuō)明書
發(fā)布時(shí)間:2017-07-21瀏覽次數(shù):2655返回列表
上海樊克生物科技詳細(xì)介紹人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒說(shuō)明書,性能優(yōu)點(diǎn),用途,特點(diǎn),注意事項(xiàng),操作步驟,技術(shù)原量,說(shuō)明書,價(jià)格,品牌等資訊,本司作為科研試劑優(yōu)質(zhì)廠家,長(zhǎng)期現(xiàn)貨供應(yīng)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物血清,培養(yǎng)基,抗體,實(shí)驗(yàn)耗材,標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品,化學(xué)試劑,染色液,蛋白質(zhì),其他試劑,系列不同的試劑盒,ELISA種屬涵蓋眾多,目前本司已和多所高校,科研院,醫(yī)院,事業(yè)單位,生物公司等達(dá)成長(zhǎng)期合作關(guān)系,由本司為其相關(guān)的試劑,歡迎來(lái)電咨詢更多產(chǎn)品詳情!
中文名:人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒
別名:人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA Kit
供應(yīng)商:上海樊克
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好。
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
產(chǎn)品用途:用于測(cè)定人血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
檢測(cè)種屬:大小鼠,人,豚鼠,兔子,豬,犬,牛羊,雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA檢測(cè)試劑盒組成:
1.30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ;
2.酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶;
3.酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 ;
4. 樣品稀釋液 6ml×1 瓶;
5.顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ;
6.顯色劑B 液 6ml×1/瓶;
7.終止液 6ml×1 瓶;
8.標(biāo)準(zhǔn)品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶;
9.標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶;
10.說(shuō)明書 1 份;
11.封板膜 2 張;
12.密封袋 1 個(gè);
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA檢測(cè)試劑盒安全性:
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
2.實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
5.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
6.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
8.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
10.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
11.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
12.按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存:
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃ 后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒使用優(yōu)點(diǎn):ELISA試劑盒可特異性定量測(cè)定疾病相關(guān)蛋白,包括細(xì)胞因子、趨化因子、β淀粉樣蛋白與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)靶標(biāo)。
1.靈敏,準(zhǔn)確和一致的性能
2.用血清、血漿、組織培養(yǎng)上清或裂解產(chǎn)物進(jìn)行過(guò)驗(yàn)證
3.在半天內(nèi)可完成的現(xiàn)成,方便的檢測(cè)
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,試劑不能直接在37 溶解;試劑或樣品配制時(shí),均需充分混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1、
加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?100 ,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100 ,注意不要有氣泡,加樣
時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37 溫育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2、 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100 (臨用前配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37 溫育1小時(shí)。
3、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400 /每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4、 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(臨用前配制)100 ,加上覆膜,37 溫育1小時(shí)。
5、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6、 每孔加底物溶液90 ,酶標(biāo)板加上覆膜37 避光顯色(反應(yīng)時(shí)間控制在15-30分鐘,當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯時(shí),即可終止)。
7、 每孔加終止溶液50 ,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物 液的加入順序相同。
8、 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度( 值)。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):
1.嚴(yán)格按照人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
2.加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。
3.封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
4.用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過(guò)程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
5.合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
6.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
7.顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
8.加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA檢測(cè)試劑盒特點(diǎn):
1、、靈敏、特異的抗體;
2、重復(fù)性和可靠性高;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
5、可檢測(cè)指標(biāo)齊全:細(xì)胞因子檢測(cè)、心肌梗塞檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)、肝纖維化檢測(cè)、自身免疫檢測(cè)、傳染病檢測(cè)、特種蛋白檢測(cè)、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)等等;
6、價(jià)格優(yōu)惠,質(zhì)量保證,大限度的節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒使用優(yōu)點(diǎn)樣本實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備及標(biāo)本的處理:
在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行
檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4.
細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5.
組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA檢測(cè)試劑盒適用領(lǐng)域:
1.免疫酶染色各種細(xì)胞內(nèi)成份的定位
2.研究抗酶抗體的合成
3.顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應(yīng)
4.定量檢測(cè)體液中抗原或抗體成份