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人ELISA檢測試劑盒基本原理
發(fā)布時間:2019-04-17瀏覽次數(shù):1701返回列表
ELISA試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。人ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。人ELISA檢測試劑盒基本原理如下:
1、將特定抗體(一抗)結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫性。一抗是待測抗體的抗體,識別待測抗體。
2、二抗是一種與酶偶聯(lián)的抗體,既保留了其免疫活性,又保留了酶的活性。二抗識別并結(jié)合待測抗體。
3、測定時,固定的一抗先與樣品稀釋液反應(yīng),將樣品中待測抗體固定;洗滌后再與二抗反應(yīng)。每一步之間都要進(jìn)行洗滌。
4、加入底物,酶作用底物,使之變色。底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物。
5、產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺有無定性或定量分析。
注意:洗滌不是反應(yīng)步驟,卻是決定成敗的關(guān)鍵。目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。