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酵母計數(shù)和活性怎么測? 用它!
發(fā)布時間:2020-07-01瀏覽次數(shù):1152返回列表
酵母菌簡介:
酵母菌是基因克隆實(shí)驗(yàn)中常用的真核生物細(xì)胞,也是食品工藝中常用的微生物,如釀酒酵母。
酵母菌細(xì)胞寬度(直徑)約2~6μm,長度5~30μm,有的則geng長,個體形態(tài)有球狀、卵圓、橢圓、柱狀和香腸狀等。由于其尺寸較小,形狀不規(guī)則,因此采用明場法無法進(jìn)行準(zhǔn)確的計數(shù),geng不易進(jìn)行酵母活性的檢測!
?采用雙熒光通道設(shè)計的細(xì)胞計數(shù)儀,可geng加準(zhǔn)確地進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)和細(xì)胞活性分析。
接下來我們看一下它是如何進(jìn)行酵母計數(shù)和活性檢測的吧?
步驟一:FDA/PI染色
取1?l FDA試劑、1?l PI試劑加入到18?l酵母菌液中,避光孵育10min。
FDA/PI試劑染色原理介紹:FDA是一種非熒光性疏水性熒光素衍生物,它可以穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞,通過細(xì)胞內(nèi)酯酶催化水解二乙酸酯基團(tuán)產(chǎn)生具有高熒光強(qiáng)度的熒光素。因此活細(xì)胞具有綠色熒光。無活性的死細(xì)胞被PI著色,發(fā)出紅色熒光。因此,可以很好的辨別死細(xì)胞與活細(xì)胞,準(zhǔn)確的進(jìn)行細(xì)胞活性的檢測。
步驟二:上樣
用移液槍吸取10?l 樣品加入到細(xì)胞計數(shù)板中。
將細(xì)胞計數(shù)板插入到LUNA FL中。
步驟三:檢測
直接點(diǎn)擊內(nèi)置的酵母檢測App
在明場下進(jìn)行調(diào)節(jié)焦距,然后點(diǎn)擊Count即開始細(xì)胞檢測,30秒內(nèi)即可完成。
步驟四:結(jié)果查看、分析、導(dǎo)出
結(jié)果查看:
我們可以得到Total /Live /Dead細(xì)胞數(shù)量、細(xì)胞活性、細(xì)胞平均尺寸等數(shù)據(jù)。
結(jié)果分析:
我們可以設(shè)置細(xì)胞分析的尺寸范圍以及聚團(tuán)情況等。
結(jié)果導(dǎo)出:
點(diǎn)擊Save/Print即可將結(jié)果導(dǎo)出,您可以選擇保存3個通道的原始圖片、加了Tag的圖片、包含了該次檢測所有信息的PDF文件。