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鐵強化牛血清,養(yǎng)細胞geng出色

發(fā)布時間:2020-11-27瀏覽次數(shù):1073返回列表

鐵對體外的細胞培養(yǎng)非常重要(1)(12)。它作為一些酶的輔因子,參與了細胞的多種生-理功能,其中至少有如下三個重要方面:

01、參與細胞的呼吸代謝

線粒體是細胞氧化代謝的部位和能量中樞,其中,線粒體膜上的琥珀酸脫氫酶扮演著關(guān)鍵角色。鐵即是琥珀酸脫氫酶的一部分,參與細胞的氧化代謝和能量生成。

02、保護細胞不受氧化損傷

鐵作為鐵卟啉結(jié)構(gòu)的核心,是過氧化氫酶和過氧化物酶等酶的關(guān)鍵組成部分,能消除過氧化氫和酚類、胺類、醛類的毒性,使細胞免于遭受H2O?等過氧化物帶來的損傷,為細胞提供抗氧化防御,使細胞geng健康。

03、提高細胞密度和存活率

鐵是細胞增殖所必需的元素。如果沒有鐵,細胞就不能在增殖時從G1期進入到S期(2,3)。缺鐵會導(dǎo)致細胞凋亡和死亡(4)。如果缺乏鐵, 細胞復(fù)制時DNA合成將受到影響。因為鐵是RNA聚合酶所必需(11),它也是核糖核苷酸還原酶的組成部分(5)。而核糖核苷酸還原酶是細胞在合成DNA過程中,將核糖核苷酸轉(zhuǎn)變成脫氧核糖核苷酸的限速酶(6)。已知有藥廠已開發(fā)鐵配方專-利,用于加入到細胞培養(yǎng)基中,以提高細胞密度和存活(10)。

對于無血清培養(yǎng)基,鐵也是一種重要的補充劑。有研究顯示,在無血清培養(yǎng)基中,鐵能誘導(dǎo)LI 210細胞生長。并且它不依賴轉(zhuǎn)鐵蛋白的存在(7)。

在將鐵強化小牛血清作為胎牛血清(FCS)的替代品方面,從1988年以來,已陸續(xù)有一些相關(guān)報道,如對于一些細胞系,鐵強化小牛血清在促細胞生長或克隆率方面,等效或優(yōu)于FCS(13)。對于牛肌源細胞,在DMEM/M199培養(yǎng)基中添加鐵強化小牛血清,在細胞增殖速率方面,優(yōu)于胎牛血清、新生牛血清和馬血清(8)。在CHO細胞的HGPRT基因突變試驗中(該實驗常用于化學(xué)物的遺傳毒性檢測),在倍增時間和克隆率方面,補鐵型小牛血清和FCS沒有顯著差異,補鐵型小牛血清完全可以取代FCS,從而降低實驗成本(9)。

值得指出的是,鐵強化牛血清的使用效果與細胞類型和所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基關(guān)系密切。在一項細胞長期生長的比較研究中,發(fā)現(xiàn)鐵強化小牛血清性能不如FCS,但優(yōu)于小牛血清(14)。

因此,使用鐵強化牛血清,可以預(yù)期,其性能必然優(yōu)于普通牛血清

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