問(wèn)：樣本可以做成冰凍切片嗎？

答 可以的?？乖迯?fù)步驟不推薦用加熱的方法，推薦用抗體洗脫液

問(wèn) 所有操作要避光嗎？

答 不需要，在常規(guī)環(huán)境下操作就可以，染料的熒光強(qiáng)度很高。

問(wèn) 抗體修復(fù)液每一輪修復(fù)都要換嗎？

答 是的，每一輪都要根據(jù)抗體選擇相應(yīng)的修復(fù)液。

問(wèn) 染料的選擇會(huì)影響后染色嗎，有共定位的話(huà)怎么辦？

答 共定位的情況，我們可以通過(guò)單一通道觀(guān)察來(lái)好的檢測(cè)各指標(biāo)的分布情況，染料不會(huì)對(duì)染色有影響，串色的情況需要預(yù)實(shí)驗(yàn)做充足，包括抗體稀釋比例，染料與放大液比例，修復(fù)條件的確定。

問(wèn) 多色用的一二抗各是什么種屬？

答 多色的優(yōu)勢(shì)在于一二抗種屬無(wú)需特別要求，一抗根據(jù)樣本種屬選擇既可，二抗根據(jù)一抗選擇即可，多個(gè)抗體組合，種屬不會(huì)有影響。

問(wèn) 抗體洗脫和微波修復(fù)哪種方式洗脫？

答 微波修復(fù)洗脫穩(wěn)定，抗體洗脫液對(duì)大多數(shù)抗體都管用，難洗的抗體延長(zhǎng)洗脫時(shí)間就可以啦！

問(wèn) 實(shí)驗(yàn)用時(shí)真的一天能做完嗎？

答 相比普通的組織熒光實(shí)驗(yàn)，我們一抗的孵育時(shí)間只需室溫30min，二抗和信號(hào)放大步驟只需孵育10min，能大大節(jié)約時(shí)間，五色左右可在一天內(nèi)做完。

問(wèn) 多色樣本的寄送有條件限制嗎？

答 正常的石蠟切片和組織芯片很穩(wěn)定，只要防震盒常溫運(yùn)輸即可，冰凍切片的話(huà)，需要干冰低溫運(yùn)輸。

問(wèn) 我的組織還有GFP蛋白，給結(jié)果的時(shí)候能排除干擾嗎？

答 可以的，結(jié)果分析的時(shí)候可以避免綠色通道，分析軟件賦予的顏色是偽彩色，可以換其他顏色。

問(wèn) 我這邊提供抗體的話(huà)，抗體需要滿(mǎn)足什么條件嗎？

答 抗體起碼要滿(mǎn)足IHC/IF的實(shí)驗(yàn)應(yīng)用，各品牌供應(yīng)商都會(huì)提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的，我司組化抗體經(jīng)過(guò)嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，是不錯(cuò)的選擇。

問(wèn) 如果我能提供抗體給你們做服務(wù)的話(huà)，需要的抗體量是多少？

答 需要的抗體量要根據(jù)樣本數(shù)來(lái)，但一般來(lái)講，50-100ul的抗體足夠完成預(yù)實(shí)驗(yàn)+正式實(shí)驗(yàn)了。問(wèn) 在指標(biāo)與染料的搭配以及染色順序上，有什么規(guī)律嗎？

答 并沒(méi)有一個(gè)特別的線(xiàn)性關(guān)系，和蛋白的種類(lèi)、表達(dá)量以及修復(fù)條件都有關(guān)系，所以會(huì)多因素考慮，多嘗試，預(yù)實(shí)驗(yàn)很重要。

問(wèn) TSA技術(shù)原理中有抗體洗脫的步驟，但是在你們的試劑盒步驟說(shuō)明中卻沒(méi)有？

答 試劑盒步驟中的抗原修復(fù)過(guò)程就是抗體洗脫過(guò)程。

問(wèn) B細(xì)胞、T細(xì)胞、DC細(xì)胞常用maker能推薦下嗎？

答 

T細(xì)胞：CD3、CD4、CD8、FoxP3（再細(xì)化還有：GranzymeB、PD-1、TIM-3、CD45）
B細(xì)胞：CD19 ；
DC細(xì)胞：CD8α、CD11b