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RNA電泳如何得出漂亮的條帶？
發(fā)布時(shí)間：2022-05-07瀏覽次數(shù)：1001返回列表
方法:
1.電泳槽,制膠器,梳子等的清洗:去污劑浸泡過(guò)夜——>自來(lái)水沖洗干凈——>ddH20 沖洗——>3%H2O2 灌滿浸泡過(guò)夜——>滅活的 0.1%DEPC水沖洗干凈——>超凈臺(tái)內(nèi)紫外線照射過(guò)夜.
2.燒瓶,燒杯,藥匙,量筒等制膠器械的清洗:0.1%DEPC 水浸泡過(guò)夜后高壓消毒滅活,烘箱烘干.或者 ddH20 清洗干凈, 超凈臺(tái)內(nèi)紫外線照射過(guò)夜.
3.電泳緩沖液必須是 RNase free.
4.預(yù)電泳 5-10min 減少了非特異 RNA 條帶的出現(xiàn),有利于分離和純化,同時(shí)可根據(jù)電泳儀是否冒泡判斷電泳儀裝置是否有誤.
5.樣品是在電泳緩沖液液略低于膠表面而不是在高過(guò)膠面時(shí)加進(jìn)齒槽,避免了加樣時(shí) RNA 的擴(kuò)散,加樣后 RNA 從齒槽逸出造成 RNA 的彌散及定位不良等現(xiàn)象.
6.電泳 3-5min 讓 RNA 進(jìn)入凝膠后再加電泳緩沖液液高過(guò)表面,確保了加到每個(gè)槽中的 RNA 量及定位的準(zhǔn)確性,從而有利于 DNA 的鑒定和純化.
