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古朵詳述、酶聯(lián)免疫吸附劑測定ELISA的相關(guān)問題
發(fā)布時(shí)間:2023-02-07瀏覽次數(shù):849返回列表
古朵詳述、酶聯(lián)免疫吸附劑測定ELISA的相關(guān)問題
1 如何洗板?
文獻(xiàn)說“手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后,應(yīng)靜置15-30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孔中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干?!?
想問的是:“甩去洗滌液”中如何“甩去”?如果整塊板一起甩不會導(dǎo)致交叉污染嗎?請內(nèi)行詳細(xì)指點(diǎn)一下。
2 標(biāo)本為動物腦勻漿,需要稀釋嗎?稀釋多少倍合適呢?
1.我經(jīng)常這么干沒有遇到交叉污染的問題,就是整塊板翻轉(zhuǎn),洗滌液倒入下水道以后,維持孔朝下底朝天的樣子往下甩動板,跟瓶子里的后一點(diǎn)水想倒出來的動作差不多.我一般覺得是往下甩,避免左右晃動比較好.不過你如果擔(dān)心污染,不甩也沒有關(guān)系,直接扣在吸水紙上吸干也是可以的,但是甩幾下,省很多紙啊.重點(diǎn)是洗滌液倒干凈之前不要把板翻回來正面.但是倒干凈也不等于完全干掉,只要液體少到無法流淌就可以了,如果真干了的話,抗體抗原的結(jié)合可能失效.
倒掉樣本時(shí)候需要小心,之后的洗滌步驟其實(shí)不容易污染.
2.動物腦勻漿我沒有做過.提醒你跟試劑生產(chǎn)商確定好是否能夠測這種樣本.我曾經(jīng)遇到過ELISA試劑對含人血清的樣本發(fā)生非特異性反應(yīng)的倒霉情況,問了生產(chǎn)商才知他們根本沒有測試過人血清。
如果生產(chǎn)商測試過動物腦勻漿的話,應(yīng)該也能夠告訴你恰當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。
第二個(gè)辦法是從文獻(xiàn)中找先例,沿用別人優(yōu)化過的試驗(yàn)方案。
否則的話,你需要先做一個(gè)稀釋試驗(yàn),使用幾個(gè)你確定為陽性的樣本(不要次就用上你珍貴的實(shí)驗(yàn)樣品),稀釋4X,10X,100X三個(gè)倍數(shù)應(yīng)該夠了(我做過的幾個(gè)ELISA試劑對血清樣本的建議倍數(shù)是4倍比較常見),加上未稀釋的你就有四個(gè)濃度梯度。關(guān)于稀釋的注意事項(xiàng)你如果不清楚再問吧。
既然如此,你就應(yīng)該跟生產(chǎn)商要制作勻漿的實(shí)驗(yàn)方法啦,跟著他們的辦法做為保險(xiǎn)。如果是大公司,兩個(gè)工作日之內(nèi)一定會有回復(fù),有時(shí)候網(wǎng)站上就能找到這種信息。
酶聯(lián)免疫吸附 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。