必知干貨| HE染色石蠟切片的制作的七個步驟 　　設(shè)備用具：切片機、恒溫箱、溶蠟箱、玻璃缸、載玻片、蓋玻片、手術(shù)刀片、鑷子、包埋盒。 　　試 劑 ：10%福爾馬林、酒精、二甲-苯、固體石蠟、蘇木-精、酸水、氨-水、酒精伊紅染色劑型、加拿大樹膠 　　(二)HE染色石蠟切片的制作過程 　　步驟一：取材與固定： 　　取動物新鮮組織塊(一般厚度不超過0.5厘米)投入預(yù)先配好的固定液中(10%福爾馬林，Bouin氏固定液)使組織、細(xì)胞的蛋白質(zhì)變性凝固，以防止細(xì)胞死后的自溶或細(xì)菌的分解，從而保持細(xì)胞本來的形態(tài)結(jié)構(gòu)。 　　步驟二：脫水透明： 　　一般用由低濃度到高濃度酒精作脫水劑，逐漸脫去組織塊中的水份。再將組織塊置于既溶于酒精，又溶于石蠟的透明劑二甲-苯中透明，以二甲-苯替換出組織塊的中酒精，才能浸蠟包埋。 　　步驟三：浸蠟包埋： 　　將已透明的組織塊置于已溶化的石蠟中，放入溶蠟箱保溫。待石蠟完全浸入組織塊后進(jìn)行包埋：先制備好容器(如折疊一小紙盒)，倒入已溶化的石蠟，迅速夾取已浸透石蠟的組織塊放入其中。冷卻凝固成塊即成。包埋好的組織塊變硬，才能在切片機上切成很薄的切片。 　　步驟四：切片與貼片： 　　將包埋好的蠟塊固定于切片機上，切成薄片，一般為5—8微米厚。切下的薄片往往皺折，要放到加熱的水中燙平，再貼到載玻片上，放45℃恒溫箱中烘干。 　　步驟五：脫蠟 　　常用HE染色，以增加組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)各部分的色彩差異，利于觀察。蘇木-精(Hematoxylin，H)是一種堿性染料，可將細(xì)胞核和細(xì)胞內(nèi)核糖體染成藍(lán)紫色，被堿性染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜堿性。伊紅(Eosin，E)是一種酸性染料，能將細(xì)胞質(zhì)染成紅色或淡紅色，被酸性染料染色的結(jié)構(gòu)具有嗜酸性。染色前，須用二甲-苯脫去切片中的石蠟，再經(jīng)由高濃度到低濃度酒精，蕞后入蒸餾水，就可染色。 　　步驟六：染色　　 HE染色過程是： 　?、賹⒁讶胝麴s水后的切片放入蘇木-精水溶液中染色數(shù)分鐘。 　?、谒崴鞍?水中分色，各數(shù)秒鐘。 　?、哿魉疀_洗1小時后入蒸餾水片刻。 　?、苋?0%和90%酒精中脫水各10分鐘。 　?、萑刖凭良t染色液染色2—3分鐘。 　　步驟七：脫水透明： 　　染色后的切片經(jīng)純酒精脫水，再經(jīng)二甲-苯使切片透明。 　　步驟八：封固： 　　將已透明的切片滴上加拿大樹膠，蓋上蓋玻片封固。待樹膠略干后，貼上標(biāo)箋，切片標(biāo)本就可使用。 　　HE染色石蠟切片 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量”的方針