精品国模一区二区三区,一区二区三区无码精油的作用,中文字幕亚洲欧美日韩在线不卡 ,日韩人妻一区二区三区蜜桃视频

當前位置:給覽網(wǎng) » 公司 » 上海古朵生物科技有限公司

在線溝通:

沒有合適的產(chǎn)品?是否在線詢價?
詢價標題
聯(lián)系人
電話
主要內(nèi)容
驗證碼  
產(chǎn)品搜索
 
聯(lián)系我們

公司名稱:上海古朵生物科技有限公司

聯(lián)系人:洛辰

電話:18321664727

手機:13621980056

郵件:2712232205@qq.com

地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號

會員站:http://www.fkbio-sh.com

手機站:http://m.fkbio-sh.com

新聞中心

古朵技術(shù)分享—雙向電泳樣品緩沖液選用的基本原則

發(fā)布時間:2023-03-24瀏覽次數(shù):914返回列表

  古朵技術(shù)分享—雙向電泳樣品緩沖液選用的基本原則

  1、蛋白質(zhì)樣品的特征:

  復(fù)雜,含鹽或其他污染物

  易被蛋白酶降解

  動態(tài)范圍寬(>X106)

  溶解性不均一(疏水性/親水性)

  分子量、等電點的范圍寬(10-500KDa,pH2-14)

  2、樣品分離的基本要求:

  高靈敏度和分辨率

  寬動態(tài)范圍

  小樣品體積

  高通量

  合適的溫度和pH

  避免蛋白酶降解

  適合與高靈敏度的質(zhì)譜聯(lián)用

  盡量少的操作步驟減少污染和損失

  3、樣品緩沖液的組成:

  3.1 尿素:一種中性變性劑,破壞氨基酸殘基之間的非共價鍵和離子鍵而不影響等電聚焦,濃度范圍5-9.8mol/L,溶液不穩(wěn)定,降解生成的氰酸根離子與蛋白質(zhì)的氨基結(jié)合改變蛋白質(zhì)的等電點.加精胺能降低影響.

  3.2 硫尿:與尿素一起,能增加疏水膜蛋白的溶解性,缺點是在平衡液里與蛋白的半胱/氨酸競爭結(jié)合碘代乙酰胺,會使蛋白的烷基化不完/全,硫尿還有抑制SDS與蛋白質(zhì)結(jié)合的作用,也可能增加脂類的溶解性,影響二向的效果.一般是2mol/L的硫尿與5-7mol/L尿素結(jié)合使用.

  3.3 去污劑:蛋白質(zhì)在去折疊后,會暴露出大量的疏水性殘基,去污劑用于破壞蛋白質(zhì)分子間的疏水相互作用.陰離子去污劑SDS,不利于穩(wěn)定等電聚焦中蛋白質(zhì)的等電點,濃度不超過0.25%,

  NP-40:SDS>=8:1,常用的有非離子型去污劑Triton X-100和NP-40,兩性離子去污劑CHAPS,SB3-10等.非離子型去污劑和兩性離子去污劑能在不破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),保持生物活性的情況下改善蛋白質(zhì)的溶解度,但是必須選擇合適的濃度,濃度太低不能改善蛋白質(zhì)的溶解性,濃度太高會使蛋白帶變寬,影響分辨率和引起紋理現(xiàn)象.各種去污劑結(jié)合使用濃度范圍0.5-4%.

  3.4 還原劑:還原劑能打開蛋白質(zhì)的二硫鍵.一般使用β-巰基乙醇、二硫蘇糖醇(DTT)和二硫赤蘚糖醇(DTE),DTT和DTE本身帶有電荷,在等電聚焦時會遷移到pH范圍以外,從而使某些蛋白質(zhì)的二硫鍵重新配對使溶解度降低而重新沉淀下來.一般的濃度范圍10-100mmol/L,非離子型還原劑如三丁基膦(TBP)2mmol/L能增加蛋白質(zhì)的溶解性,并可幫助蛋白質(zhì)從第1向轉(zhuǎn)移到第二向.不過TBP有劇/毒,操作時應(yīng)相當小心,并做好防護工作.

  3.5 載體兩性電解質(zhì):它有兩個基本特性,一是兩性的,能夠在分離柱中達到一個平衡位置,二是可以作為“載體",能夠“運載"電流和pH能力.Biolyte是在丙烯乙胺與乙烯亞胺縮合并蒸餾得到的多胺混合物中再引入磺酸基團或磷酸基團后合成的.其他特性是分子量小,可溶性好,緩沖能力強,導(dǎo)電性均勻,紫外吸收低,不發(fā)熒光,、無生物學(xué)效應(yīng),具有螯合性質(zhì).所有載體兩性電解質(zhì)分子都荷電,只是在溶液中荷正電和荷負電是相等的,所以總的凈電荷為零,當引入電場時,載體兩性電解質(zhì)分子將向陰極和陽極移動,當它達到凈電荷是零的位置時才停止從而給出一個pH梯度.也必須選用合適的濃度,一般使用的濃度范圍是 0.2-2%.

  3.6 蛋白酶抑制劑:蛋白酶抑制劑能夠暫時或者永/久性的破壞蛋白酶的活性,減少蛋白質(zhì)被降解和修飾的可能性.

  3.7 DNase I 和RNase A.消化DNA和RNA,減少污染.

  雙向電泳樣品緩沖液 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導(dǎo)向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量”的方針。

精品国模一区二区三区,一区二区三区无码精油的作用,中文字幕亚洲欧美日韩在线不卡 ,日韩人妻一区二区三区蜜桃视频 久久夜色精品国产| 狠狠躁夜夜人人爽天96| 久久久精品| 大桥久未无码吹潮在线观看| 人体摄影艺术| 无码人妻AⅤ一区二区三区陷阱| 成人3D动漫一区二区三区| 成人小说亚洲一区二区三区| 亚洲AV无码久久精品狠狠爱浪潮 | 极品人妻XXXXOOOO| 扒开女人内裤猛进猛出流出白液| 午夜精品久久久久久99热| 老太做爰又大又粗又爽| 午夜精品久久久久久| 国产成人综合亚洲AV第一页| 午夜精品久久久久久久| А√天堂资源在线| 波多野结衣乳巨码无在线观看| 中国A级毛片免费观看| 一本一道色欲综合网中文字幕| 熟妇丰满多毛的大隂户| 纯爱无遮挡h肉动漫在线播放| 人体艺术视频| 亚洲欧美国产精品专区久久| 无码日韩精品一区二区人妻| 人妻少妇无码精品视频区| 国产精品久久人妻无码电影张丽| 少妇与大狼拘作爱视频| 四虎MV最新地域网名怎么取| 少爷托着娇乳撞击娇吟| 日韩AV高清在线看片| 亚洲日韩AV一区二区三区中文| 高潮A片WWW张柏芝陈冠希| 欧美激情一区二区三区| 少妇又色又紧又爽又刺激视频 | 黑人巨大JEEP日本人| 天天做天天爱天天爽综合网| 久久久久久亚洲精品| 国产性猛交╳XXX乱大交| 久久久久99精品成人片三人毛片| 重囗味另类老妇|