古朵生物：CCK-8試劑盒的操作步驟

  CCK-8試劑盒，是用于測定細(xì)胞增殖或毒性實(shí)驗(yàn)中活細(xì)胞數(shù)目的一種高靈敏度，無放射性的比色檢測法。

  CCK法應(yīng)用非常廣泛，如藥物篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗(yàn)以及生物因子的活性測驗(yàn)等。

  操作步驟：

  1、在96孔板中配置100μl的細(xì)胞懸液，將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)(在37℃，5%CO2的條件下)。

  2、向培養(yǎng)板加入10μl不同濃度的待測物質(zhì)。

  3、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱孵育一段適當(dāng)?shù)臅r(shí)間(例如6、12、24或48小時(shí))。

  4、向每孔加入10μlCCK-8溶液(注意不要在孔中生成氣泡，它們會(huì)影響OD值的讀數(shù))。

  5、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時(shí)。

  6、用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度，如無450nm濾光片，可以使用420-480nm的濾光片。

  7、如暫時(shí)不測定OD值，打算以后測定的話，可以向每孔中加入10μl0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下，在24小時(shí)內(nèi)吸光度不會(huì)發(fā)生變化。

  注意： 如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性，可以加CCK之前換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基)，去掉影像。 當(dāng)然影響比較小的情況下，可以不換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基加入后的空白吸收即可。

  CCK-8試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求”的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量”的方針