古朵生物：hepes緩沖液配制詳細介紹

  緩沖液不論是在有機化學還是無機化學中，其地位都是“尊貴”的。因為在許多實驗操作中進行反應都必須要求酸堿性保持在一個合理且穩(wěn)定的范圍內，而這些條件的實現(xiàn)就需要通過加入一定量的緩沖液才能達到。除了Tris、Tris-hcl、Caps等是多見的緩沖液，另外還有PB、PBS以及MOPS緩沖液也是常用類型，那么這些緩沖液該如何配制呢?下面古朵生物技術給大家介紹一下。

  在日常實驗操作過程中使用較為頻繁的就是緩沖液，但因其類型較多，像常見的有：磷酸鹽、硼酸鹽、Tris、HEPES等溶液，通常會根據(jù)實驗要求來進行選擇。這主要是因為緩沖液的選擇錯誤會造成實驗結果的偏差，如使用pH值相同的類型溶液，但因為某種離子導致沉淀現(xiàn)象，就可能使實驗產生不需要的化學反應，影響實驗操作。由于hepes溶液近期使用操作誤區(qū)較多，所以下面就詳細給大家介紹一下它。

  作為一種非離子型的兩性溶液，其pH值在7.2-7.4之間，是大多數(shù)實驗中的選擇溶液，例如用于生化診斷試劑盒和細胞培養(yǎng)液中。尤其是在開放式細胞培養(yǎng)中它可以較為穩(wěn)定的維持pH值，并對細胞性作用。

  具體的配比詳解如下：

  1、以配制500毫升的HEPES，PH等于7的儲備溶液為例。首先準備119g的粉末溶解到400毫升的去離子水中，然后加入0.5-1M的氫氧化鈉溶液，將其調節(jié)至所需要的pH值，再加入去離子水定容，在4度條件下保存即可。

  2、如果是要在HEPES中加入少量鹽，以500毫升為例，其配比方法為準備HEPES溶液6.5g,氯化鈉8g,磷酸氫二鈉七水合物0.19g,然后使用0.5M的氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值，進行定容。

  3、如果是2×HEPES緩沖鹽溶液的配制，需按照氯化鈉1.6g,氯化鉀0.074g，磷酸氫二鈉二水合物0.027g和1g的HEPES充分溶解至90毫升的去離子水中，然后用0.5M氫氧化鈉溶液調節(jié)至所需pH值，再用蒸餾水定容即可。

  4、100 x HEPES貯存液配比為取23g的HEPES溶于90ml雙蒸水中，然后添加1M氫氧化鈉溶液調節(jié)pH值到7.5-8.0，加去離子水定容至100ml，過濾除菌，在4℃或-20℃保存下保存即可。

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