古朵新聞：蛋白含量的測定—考馬斯亮藍蛋白測定試劑盒

  原理

  蛋白質(zhì)分子具有-NH3+基團，當棕紅色的考馬斯亮藍顯色劑加入蛋白標準液或樣品中時，考馬斯亮藍染料上的陰離子和蛋白-NH3+結(jié)合，使溶液變?yōu)樗{色，通過測定吸光度可計算出蛋白含量。

  試劑的配制

  1、考馬斯亮藍貯備液 60×1瓶。臨用時按照所需量用蒸餾水1:4稀釋(即5倍稀釋)，配成應用液，4℃貯存。

  2、蛋白標準液 0.615g/L蛋白標準液1ml×1支，4℃貯存。

  3、配制2%組織勻漿。

  操作

  1、樣本前處理 ①配制2%組織勻漿稱取待測組織的重量，按重量體積比加生理鹽水制備成10%的組織勻漿，1000-3000r/min，離心10min(根據(jù)所測指示不一樣，則所需轉(zhuǎn)速不一樣)，然后取組織勻漿上清再用生理鹽水按1:9稀釋成1%組織勻漿，或用生理鹽水按1:4稀釋成2%的組織勻漿待測。②血清可用生理鹽水按血清：生理鹽水1:49稀釋，待測。

  總的來說，測定范圍為1g/L(mg/ml)左右為宜，請在批量測試前先做1~2個樣本的預試。

  2、按表操作

  蛋白含量操作步驟

  試劑

  空白管

  標準管

  測定管

  DDH2O(ml)0.05

  1g/L標準液(ml)—0.05—

  樣品(ml)——0.05

  考馬斯藍顯色劑(ml)3.03.03.0

  混勻后靜置10min，于595nm波長處比色(1cm光徑比色杯)，用空白管調(diào)零，測定各管的吸光度。

  3、蛋白含量的計算

  蛋白含量(g/L)=(測定管吸光度-空白管吸光度)/(標準管吸光度-空白管吸光度)×標準管濃度(g/L)

  考馬斯亮藍蛋白測定試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務質(zhì)量"的方針。