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公司名稱:上海古朵生物科技有限公司

聯(lián)系人:洛辰

電話:18321664727

手機:13621980056

郵件:2712232205@qq.com

地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號

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大鼠B因子(BF)elisa試劑盒使用說明

發(fā)布時間:2023-07-03瀏覽次數(shù):834返回列表

  大鼠B因子(BF)elisa試劑盒使用說明

  Elisa kit規(guī)格:48孔配置/96孔配置

  標準品稀釋液:1.5ml×1瓶

  酶標試劑:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)

  【大鼠B因子(BF) elisa試劑盒】本試劑僅供研究使用

  計算:

  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

  試劑盒組成:

  封板膜:2片(48)/2片(96)

  說明書:1份

  密封袋:1個

  標準品: 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存

  酶標包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存

  樣品稀釋液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

  顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

  顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存

  終止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存

  濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存

  實驗原理:

  本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠B因子(BF) 水平。用純化的大鼠B因子(BF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入B因子(BF) ,再與HRP標記的B因子(BF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的B因子(BF)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠B因子(BF) 濃度。

  目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中B因子(BF) 的含量。

  服務承諾:

  供貨期:款到發(fā)貨。

  工作時間內(nèi)免費的技術(shù)咨詢和指導 。請來電咨詢

  為客戶提供來樣檢測服務,大限度實驗結(jié)果的有效性(免費代測)。

  保存條件及有效期:

  試劑盒保存:2-8℃| 有效期:6個月

  【大鼠B因子(BF) elisa試劑盒】樣本處理及要求:

  1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。

  2 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。

  3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

  4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。

  5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

  6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.

  7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

  操作步驟:

  1.標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在、第二孔中分別加標準品100μl,然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1800ng/L,1200ng/L,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。

  2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

  3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

  4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

  6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

  7. 溫育:操作同3。

  8. 洗滌:操作同5。

  9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

  10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

  11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

  【大鼠B因子(BF) elisa試劑盒】注意事項:

  1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

  2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

  3. 各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

  4. 請每次測定的同時做標準曲線,好做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

  5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  6. 底物請避光保存。

  7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

  8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

  9. 本試劑不同批號組分不得混用。

  10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

  試劑盒性能:

  1.樣品線性回歸與預期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.95以上。

  2.批內(nèi)與批見應分別小于9%和11%

  檢測范圍:

  0.2IU/L - 6IU/L

  ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務質(zhì)量"的方針。

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