【古朵生物】如何評(píng)價(jià)和選擇支原體檢測(cè)試劑盒

  要選一款合適的支原體檢測(cè)試劑盒，有如下幾個(gè)評(píng)價(jià)指標(biāo)：

  1. 靈敏度。

  靈敏度常用支原體基因組的拷貝數(shù)或支原體菌株的CFU表示。

  2. 特異性和廣譜性。

  質(zhì)量好的試劑盒應(yīng)檢測(cè)的支原體物種越多越多，并且特異性強(qiáng)，即只針對(duì)支原體，不針對(duì)其他細(xì)菌等微生物，沒有交叉反應(yīng)。

  3. 穩(wěn)定性。

  凍干粉比液體試劑的穩(wěn)定性高。

  4. 樣本類型及樣本處理。

  一款好的試劑盒，會(huì)標(biāo)出它適合的樣本類型，也會(huì)說明如何處理樣本。要注意有的樣本含有抑制PCR反應(yīng)的物質(zhì)，因此需要處理。

  5. 對(duì)照品。

  一個(gè)好的試劑盒，會(huì)帶有陽(yáng)性對(duì)照和內(nèi)控對(duì)照。內(nèi)控對(duì)照是用于監(jiān)測(cè)PCR是否正常。如果樣本含有抑制PCR的物質(zhì)，則內(nèi)控對(duì)照的條帶會(huì)發(fā)生缺失。有嚴(yán)重支原體污染的樣本由于樣本中的支原體對(duì)內(nèi)控對(duì)照產(chǎn)生了競(jìng)爭(zhēng)性抑制，因此支原體條帶越強(qiáng)，內(nèi)控條帶越弱(下圖)。

  圖. 1. 100 bp DNA Ladder;2. 陰性對(duì)照，有內(nèi)控條帶;3. 陽(yáng)性對(duì)照，有支原體陽(yáng)性條帶;4. 樣本有PCR抑制劑;5.陰性樣本;6.陽(yáng)性樣本，支原體污染較輕;7.陽(yáng)性樣本，支原體污染較重。圖片來自Minerva Biolabs公司生產(chǎn)的Venor®GeM Advance支原體檢測(cè)試劑盒說明書

  但支原體核酸檢測(cè)法(NAT)并沒有載入我國(guó)藥典。我們藥典的是支原體培養(yǎng)法和DNA染色法。但2018年《中國(guó)藥事》第8期上，中國(guó)食品藥品檢定研究院刊發(fā)了一篇文章——《支原體檢查的核酸檢測(cè)方法及方法學(xué)驗(yàn)證的思考》，提出提出要與接軌，逐漸推進(jìn)NAT的開展，因其“具有快速、靈敏、便捷等特點(diǎn)”。

  歐洲藥典規(guī)定，核酸法如替代培養(yǎng)基，核酸法的靈敏度需達(dá)到10 CFU·mL-1;如替代DNA染色法，核酸法的靈敏度需達(dá)到100 CFU·mL-1。該文也提出，需對(duì)NAT進(jìn)行特異性、低檢出限和耐用性的驗(yàn)證。

  因此，對(duì)于需要NAT法檢查支原體的生物制品和細(xì)胞治療產(chǎn)品企業(yè)，可選擇試劑盒已經(jīng)驗(yàn)證并提供有參比物質(zhì)的知名品牌廠家，盡管后續(xù)仍需按照待測(cè)樣本類型進(jìn)行方法的適用性驗(yàn)證，并同步開展藥典方法的平行檢測(cè)研究，但已為NAT法檢查支原體帶來極大的方便。

  ELISA試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。