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Elisa實(shí)驗(yàn)原理:酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定原理與應(yīng)用方向

發(fā)布時(shí)間:2023-08-08瀏覽次數(shù):828返回列表

  酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定原理與應(yīng)用方向


  酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定簡(jiǎn)介 :

  酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法,簡(jiǎn)稱ELISA,是實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)方法。 酶是能夠催化化學(xué)反應(yīng)的特殊蛋白質(zhì),其催化效力超過(guò)目前所有人造催化劑。ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應(yīng)結(jié)合起來(lái)的一種微量分析技術(shù)。酶標(biāo)記抗原或抗體以后,既不影響抗原抗體反應(yīng)的特異性,也不改變酶本身的活性。因此ELISA具有準(zhǔn)確性高、檢測(cè)時(shí)間短、價(jià)格低廉、判斷結(jié)果有客觀標(biāo)準(zhǔn)、結(jié)果便于記錄和保存等優(yōu)點(diǎn),適合于大批標(biāo)本的檢測(cè),廣泛應(yīng)用于食品安全檢測(cè)、醫(yī)療檢測(cè)以及免疫實(shí)驗(yàn)分析等領(lǐng)域。

  酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定原理 :

  ELISA必須遵守以下3個(gè)核心原理:

  1)抗原抗體能吸附于固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;

  2)抗原或抗體可通過(guò)共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;

  3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來(lái)判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應(yīng)的深淺繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并依此計(jì)算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。

  在ELISA中酶起到很關(guān)鍵的作用,常用于ELISA法的酶有辣根過(guò)氧化物酶,堿性磷酸酯酶等,其中尤以辣根過(guò)氧化物酶為多。酶結(jié)合物是酶與抗體或抗原, 半抗原在交聯(lián)劑作用下聯(lián)結(jié)的產(chǎn)物,它不僅具有抗體抗原特異的免疫反應(yīng),還能催化酶促反應(yīng),顯示出生物放大作用。

  酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定應(yīng)用方向 :

  ELISA應(yīng)用的范圍很廣,而且正在不斷地?cái)U(kuò)大,原則上ELISA可用于檢測(cè)一切抗原、抗體及半抗原,可以直接定量測(cè)定體液中的可溶性抗原。在實(shí)際應(yīng)用方面可用于疾病的臨床診斷、疾病監(jiān)察、疾病普查、法醫(yī)檢查、獸醫(yī)及農(nóng)業(yè)上的植物病害的診斷檢定等。因此,它和生物化學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、藥理學(xué)、流行病學(xué)及傳染病學(xué)等方面密切相關(guān)。按照待測(cè)物性質(zhì)的不同,ELISA反應(yīng)可以分為抗原檢測(cè)反應(yīng)及抗體檢測(cè)反應(yīng)。

  ELISA檢測(cè)抗體,已獲得對(duì)多種傳染病和寄生蟲病的血清學(xué)診斷,亦開始廣泛用于現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查。在寄生蟲病方面,它用于對(duì)瘧原蟲、阿米巴、利日曼原蟲、錐蟲、血吸蟲、囊蟲、弓漿蟲、肺吸蟲、肝吸蟲、血絲蟲、旋毛蟲病等血清學(xué)診斷,這對(duì)人醫(yī)和獸醫(yī)都很重要。在病原微生物方面已用于檢測(cè)鏈球菌、沙門氏菌、布氏桿菌、結(jié)核桿菌、麻瘋桿菌、霍亂弧菌、淋球菌、假絲酵母菌等的抗體,霍亂弧菌抗毒素的測(cè)定以及檢測(cè)斑疹傷寒立克次氏體感染后的抗體作診斷,也可用于對(duì)立克次氏體的種屬鑒別,還有用于檢測(cè)鸚鵡熱衣原體抗體的報(bào)導(dǎo)。

  ELISA也可應(yīng)用于以下病毒抗體檢測(cè):

  流感病毒、腮腺炎病毒、麻診、風(fēng)疹、輪狀病毒、皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒、腺病毒、腸道病毒、腦炎病毒、黃熱病毒、狂犬病毒和脊髓灰質(zhì)炎病毒等,其敏感性都超過(guò)目前常用的檢測(cè)方法。此外,還可用于鑒定病毒型別,例如皰疹病毒。在免疫性疾病方面有試用作自身疫病抗體測(cè)定以及對(duì)過(guò)敏的診斷,例如檢測(cè)各種過(guò)敏原的抗體、DNA抗體及甲狀腺球蛋白抗體,紅斑性痕瘡抗體等等。在衛(wèi)生學(xué)方面,可用于檢測(cè)食品中葡萄球菌腸毒素及沙門氏菌毒素等等。

  酶聯(lián)免疫試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。

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