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人蛋白ELISA檢測試劑盒的基本原理及主要應(yīng)用途徑

發(fā)布時間:2023-09-15瀏覽次數(shù):876返回列表

  人蛋白ELISA檢測試劑盒的基本原理及主要應(yīng)用途徑


  人蛋白ELISA檢測試劑盒是一種常用的實驗工具,用于定量檢測人體內(nèi)特定蛋白質(zhì)的含量。ELISA技術(shù)是一種基于免疫反應(yīng)的試驗方法,廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷中。廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷中。在科學研究方面,ELISA技術(shù)可以用于疾病相關(guān)蛋白質(zhì)的定量分析,如腫瘤標志物、炎癥介質(zhì)、生長因子等。此外,ELISA還可以用于藥物篩選、蛋白質(zhì)相互作用研究等領(lǐng)域。

  人蛋白ELISA檢測試劑盒的原理基于抗原與抗體之間的特異性反應(yīng)。該試劑盒通常包含以下組分:微孔板、標準品、抗體、輔助試劑和檢測試劑。操作流程一般分為以下幾個步驟:

  1.樣品處理:將待測樣品(血清、血漿、細胞上清等)進行預(yù)處理,如離心、稀釋等,以獲得適合檢測的樣品。

  2.樣品加載:將處理好的樣品加入到微孔板中,并將標準品加入到另外的孔中作為參照。

  3.抗體結(jié)合:在孔中加入特異性抗體,使其與待測蛋白質(zhì)結(jié)合。一般采用雙抗體夾心法,即將待測樣品中的蛋白質(zhì)與固相抗體結(jié)合,然后加入酶標記的二抗與固相抗體結(jié)合。

  4.洗滌:通過多次洗滌孔中的非特異性結(jié)合物質(zhì),以去除未結(jié)合的成分。

  5.酶標記物添加:加入一個與蛋白質(zhì)結(jié)合的酶標記物,常用的是辣根過氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)或堿性磷酸酶(alkalinephosphatase,AP),使其與待測蛋白質(zhì)形成復合物。

  6.底物反應(yīng):加入適當?shù)牡孜铮姑笜擞浳锎呋a(chǎn)生可檢測的信號物質(zhì)。一般常用的底物為TMB(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)或pNPP(對硝基苯磷酸鹽)。

  7.反應(yīng)終止:通過加入終止液,停止底物的反應(yīng),并產(chǎn)生顏色變化或熒光等信號。

  8.讀取結(jié)果:使用ELISA閱讀器讀取各孔的吸光度或熒光值,根據(jù)標準曲線計算出樣品中待測蛋白質(zhì)的濃度。

  為了確保人蛋白ELISA檢測試劑盒的質(zhì)量和可靠性,通常會設(shè)置一系列的質(zhì)量控制步驟。質(zhì)控樣品用于驗證試劑盒的靈敏度、特異性和重復性。此外,對于每個實驗批次都需要進行標準曲線的構(gòu)建,以確保結(jié)果的準確性和可比性。試劑盒的儲存和使用也需要遵循廠商提供的說明,保證試劑的穩(wěn)定性和可靠性。

  人蛋白ELISA檢測試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。

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