影響ELISA試劑盒試驗(yàn)成果的要素

  ELISA試劑盒，即酶聯(lián)免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn)，并具有操作簡(jiǎn)潔、無(wú)放射性危害的優(yōu)點(diǎn)，因此多年來(lái)廣泛應(yīng)用于各高校、醫(yī)院、血站和科研機(jī)構(gòu)的試驗(yàn)室中。

  影響ELISA試驗(yàn)的要素有如下三方面：

  一、試劑盒

  1、抗原、抗體活性對(duì)效價(jià)的影響：主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)下降或失活，成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高，對(duì)雜質(zhì)的反響靈敏度也高，試驗(yàn)中空白對(duì)照OD值偏高或假陽(yáng)性;

  2、酶結(jié)合物濃度過(guò)高，也會(huì)導(dǎo)致OD值假性增高。

  二、試驗(yàn)儀器

  1、加樣器是否通過(guò)校正，酶免測(cè)定血清用血量很少，如手工加樣器的功能不好，吸取樣品不，會(huì)使成果忽高忽低;

  2、每次洗板前，應(yīng)查看洗板機(jī)針孔有無(wú)阻塞。

  三、ELISA試劑盒操作

  1、檢測(cè)前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運(yùn)用，試劑用完及時(shí)放回冰箱冷藏，避免形成試驗(yàn)成果假性下降;

  2、加樣時(shí)留意勿觸及包被板底部，避免擦傷包被物使抗體(抗原)掉落而影響試驗(yàn)成果的性;

  3、洗刷不充分，會(huì)使成果假性增高，過(guò)分洗刷呈假陰性;

  4、比色時(shí)應(yīng)保持包被孔底部無(wú)異物、無(wú)水汽，特別是冬天板從37℃水浴箱取出時(shí)，底部留有水汽，應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色，水汽或孔內(nèi)氣泡也會(huì)使OD值升高;

  5、抗原與抗體反響達(dá)到*平衡，依賴于溫度與時(shí)刻。溫度高于45℃易引起失活及符號(hào)物掉落，溫度低于4℃，影響反響速度。

  總歸，由于ELISA試劑盒試驗(yàn)的影響要素較多，在實(shí)踐工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì)，避免和排除各種要素的影響，使之得到可靠的查驗(yàn)成果。

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