一次性PCR擴(kuò)增可以設(shè)置一系列不同的退火溫度條件（通常12種溫度梯度）的稱之為梯度PCR儀。因?yàn)楸粩U(kuò)增的不同的DNApian段其適合的退火溫度不同，通過設(shè)置一系列的梯度退火溫度進(jìn)行擴(kuò)增，從而一次性PCR擴(kuò)增就可以篩選出表達(dá)量高的適合退火溫度進(jìn)行有效的擴(kuò)增。主要用于研究未知DNA退火溫度的擴(kuò)增，這樣既節(jié)約時(shí)間，也節(jié)約經(jīng)費(fèi)。在不設(shè)置梯度的情況下亦可當(dāng)做普通的PCR用。

正真的梯度，是每一排管都有的加熱控溫探頭，2009年為止只有美國ABI公司可以做到。其他的都是從兩頭的熱傳遞來設(shè)計(jì)控溫。

梯度pcr儀就是可以允許用戶在退火步驟時(shí)選擇同時(shí)進(jìn)行不同的退火溫度以篩選佳退火溫度。以wealtec的SEDI G為例，96孔控溫模塊按照8x12排布，解鏈步驟設(shè)置完后，設(shè)置退火步驟時(shí)，可以選擇“梯度步驟”，此時(shí)程序會(huì)允許你設(shè)置梯度溫控范圍，讓12個(gè)縱列孔位在此步驟時(shí)以不同溫度運(yùn)行。

注意事項(xiàng)：
a、儀器后面有通風(fēng)口，為保持通風(fēng)口的通暢，后兩端必須離開墻壁 10－15cm，不要在儀器的周圍堆放雜物。
b、本儀器可在 5℃－40℃的環(huán)境下使用，適環(huán)境溫度為 15℃－30℃，嚴(yán)禁在低于 5℃的環(huán)境下開機(jī)。環(huán)境濕度范圍為 20－80％。
c、建議PCR反應(yīng)結(jié)束后，取出樣品，不要過夜4℃保存樣品。

注：PCR儀適用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品工業(yè)、司法科學(xué)、生物技術(shù)、環(huán)境科學(xué)、微生物學(xué)、臨床診斷、流行病學(xué)、遺傳學(xué)、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達(dá)等領(lǐng)域以聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Picymerase Chain Reaction , PCR）為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。欲知多梯度PCR儀知識(shí)請(qǐng)?jiān)L問萊普特科學(xué)儀器（http://18bearing.com/com_leopardchina/