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非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀采購要領
發(fā)布時間:2019-04-18瀏覽次數:2031返回列表
只有選擇適合的儀器才能使其發(fā)揮應有的作用,因此在采購儀器之前一定要掌握相關的技巧。以下是非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀采購要領,希望能夠對大家有所幫助!
一、光源
光強比較:髙強度白光LED > 鹵鎢燈 >單色LED
白光LED的亮度約是鹵鎢燈的3倍左右,單色LED的10倍左右,能夠捕捉到多的熒光信號,是專業(yè)光源領域的新技術代表,2011年開始普遍應用于專業(yè)儀器,無論光強、靈敏度與均一性可與上一代氙燈光源媲美,且壽命提升了10倍以上。
鎢燈燈絲本身存在閃爍不穩(wěn)定的問題,其激發(fā)能量遠低于白光LED,事實上,無需高端品牌汽車的旗艦概念車,如豐田雷克薩斯,已經開始使用白光LED作為車頭燈。
壽命比較:髙強度白光LED = 單色LED >鹵鎢燈
白光LED的壽命長達10000小時以上,一般可以使用5-10年左右,基本上超過了一般科研儀器的正常工作壽命,基本終身無需換光源,而鹵鎢燈光源基本每2年就要換一次,費時費力,南方是不足一年就要換一次
另:鹵鎢燈每次運行需要半小時預熱,其中累計散發(fā)的熱量對熒光具有明顯的淬滅作用。
二、光路傳導
光路的傳導 光路設計應盡可能有效消除邊緣效應,光路設計是否有效消除邊緣效應,只有實驗才能檢驗
檢驗方法:96/384孔板中及四角各布置標準品,看差異
其中
a、光源直接照射微孔板上:邊緣效應明顯
b、逐孔移動式采光:無邊緣效應,但需時常校正
c、散射采光:邊緣效應較明顯,切換光源時需要光源組件移動
三、溫控模塊/Peltier
普通的Peltier加熱方式具有明顯邊緣效應,均一性差,是上一代的模塊PCR加熱技術,正處于被淘汰的邊緣。
目前好的溫控模塊:銀,在金屬中銀的導熱性能較高,升降溫速度快,孔間溫度均一性好,邊緣效應相應減少
金屬的熱傳導系數表:
銀 429 >銅 401 > 金 317 >鋁 237 >鐵 80 >錫 67 > 鉛 34.8
另:單一模塊升降溫速度高并不代表樣本升降溫速度也高,因此在溫控模塊升降溫速度對比中,終是要看樣本的升降溫速度是否快
大升降溫速度不等與平均升降溫速度
四、檢測器
熒光定量PCR靈敏度:冷CCD >CCD >光電倍增管 CPM >光電二管
CCD作為熒光信號的接受器,其質量直接決定了儀器的檢測靈敏度和穩(wěn)定性。
10℃的冷CCD,和常溫CCD有著質的區(qū)別,在專業(yè)光學領域,冷CCD的造價成本至少要比常規(guī)CCD高出一倍以上。冷CCD在低的溫度下進行光信號捕捉,能夠提供高的光感靈敏度和低背景噪音。因此,有的非洲豬瘟檢測熒光定量PCR儀能夠穩(wěn)定區(qū)分1000和2000拷貝的濃度差異,而有的只能做到區(qū)分5000和10000個拷貝數。