RNA結構探測技術|微量RNA提取試劑盒elisa試劑盒
發(fā)布時間:2018-12-19瀏覽次數(shù):1449返回列表
將化學探針與高通量測序相結合,就形成了一種靈活的方法可以揭示與細胞功能相關的RNA結構的作用機制??茖W家們采用各種化學探針,這些每種化學探針都能報告RNA分子的不同特征,通過通用的工具包就可以研究體內和體外RNA結構以及與其他分子的相互作用了。Cell雜志“RNA Structure Probing Technologies”介紹了相關的研究
將化學探針與高通量測序相結合,就形成了一種靈活的方法可以揭示與細胞功能相關的RNA結構的作用機制??茖W家們采用各種化學探針,這些每種化學探針都能報告RNA分子的不同特征,通過通用的工具包就可以研究體內和體外RNA結構以及與其他分子的相互作用了。Cell雜志“RNA Structure Probing Technologies”介紹了相關的研究成果。
超靈敏RNA二級結構預測工具
RNA與DNA指揮生命體生產(chǎn)所需蛋白,DNA包含遺傳信息,RNA將信息的編碼指令傳遞給細胞內的蛋白質制造點。
DNA主要是完全堿基配對的雙螺旋結構,相對DNA二級結構,RNA序列形成的結構更復雜。RNA互補堿基對形成的保守二級結構有時甚至比序列本身重要。RNA二級結構類型包括單鏈RNA、配對的雙鏈RNA螺旋、莖環(huán)或發(fā)卡、內飾環(huán)、突環(huán)和接觸或多環(huán)等?,F(xiàn)有的RNA二級結構預測工具不能準確地發(fā)現(xiàn)和描述假結(pseudoknot)、相吻發(fā)卡(kissing hairpin)和發(fā)卡-突環(huán)接觸(hairpin)等結構。
這款名為“bpRNA”的軟件是一款強大的RNA二級結構的大數(shù)據(jù)注釋工具。它能解析RNA結構,包括復雜的假節(jié)。所以你zui終將得到一個客觀的、精que的、容易理解的,以及包括所有莖、環(huán)和假結信息的描述,還可以得到每個結構的定位、序列和側翼堿基對。它將方便大規(guī)模地研究RNA結構。
RNA二級結構的新技術:SHAPE
RNA在生物學系統(tǒng)中有著舉足輕重的作用,它不僅將DNA的遺傳信息傳遞給蛋白,還調控了各種生物學過程。單鏈RNA就像一條膠帶,可以折疊起來通過堿基互補配對形成二級結構,這樣的3D結構決定著RNA的功能。
用于結構分析的傳統(tǒng)技術(比如X射線晶體衍射)一般比較麻煩,“而且一次只能用于一個RNA,”斯坦福大學的Howard Chang教授說。
為了同時研究多個RNA的二級結構,人們想到用化學修飾來區(qū)分未配對的核苷酸。通過RNA測序分析RNA的堿基修飾模式(即堿基配對狀態(tài)),就可以知道RNA分子是如何折疊的。不過,這類全轉錄組分析技術還存在較大的局限:要么只能靶標四種核苷酸中的兩個,要么只能用于體外研究。
Chang教授及其同事次開發(fā)了可以在活細胞中分析RNA二級結構的新技術,SHAPE(selective 2'-hydroxyl acylation and profiling experiment)。
SHAPE分析先是用NAI-N3修飾未配對的核苷酸,然后讓生物素與NAI-N3結合,通過鏈霉親和素磁珠回收修飾過的RNA。將這些RNA切割成小片段進行測序,可以揭示哪些核苷酸被修飾(也就是未配對),哪些核苷酸未被修飾(也就是配對或者結合蛋白)。