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更新時(shí)間:2011-09-23
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黃振山(先生)
Sepax Polar-Phenyl色譜柱
麻黃專用色譜柱。
Sepax Polar-Pheny色譜柱鍵合固定相采用獨(dú)特的創(chuàng)新設(shè)計(jì),以高純度具有良好機(jī)械穩(wěn)定性的硅膠為基質(zhì),通過(guò)采用高純度鍵合試劑,zui大限度實(shí)現(xiàn)單層官能團(tuán)覆蓋和完全的殘余硅醇基封尾,含碳量可高至11.0%。該填料為均一的球形顆粒,孔徑120Å,表面覆蓋率已達(dá)到zui大化,具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。由于采用了極性端基封尾的醚連接苯基基團(tuán),Polar-Phenyl柱具有優(yōu)異的芳香族化合物選擇性。通過(guò)運(yùn)用獨(dú)有的勻漿裝填技術(shù)裝填得到的Polar-Phenyl柱柱床密度均一穩(wěn)定,可保證具有zui高的柱效。通過(guò)嚴(yán)格控制單分子層形成以及封尾的化學(xué)反應(yīng)條件,可確保柱與柱之間有著可靠的重現(xiàn)性。安全注意事項(xiàng): Polar-Phenyl柱通常在高壓下運(yùn)行,如果管路連接不緊,將會(huì)導(dǎo)致有機(jī)溶劑和注入樣品的泄漏,從而對(duì)操作人員的健康產(chǎn)生影響。一旦發(fā)生泄漏,應(yīng)佩戴適當(dāng)?shù)氖痔走M(jìn)行處理。另外當(dāng)打開(kāi)色譜柱時(shí)還應(yīng)采取適當(dāng)?shù)谋Wo(hù)措施,以防止微小的硅膠顆粒進(jìn)入呼吸道。色譜柱安裝與操作: 色譜柱在運(yùn)輸過(guò)程中或在沒(méi)有使用時(shí),它的兩端總是用堵頭進(jìn)行密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí),首先移去兩端的堵頭。請(qǐng)注意將流動(dòng)相流動(dòng)的方向與柱上標(biāo)記的方向保持一致。除非出于特殊考慮,例如為了清除堵在色譜柱入口端的臟污等而需要將色譜柱反接以進(jìn)行沖洗時(shí),建議用戶在接上色譜柱時(shí)一定要遵循柱上標(biāo)記的方向。由于色譜柱的連接是整個(gè)色譜操作過(guò)程的一部分,如果密封卡套過(guò)緊,或安裝不合適,或者密封卡套與色譜柱端口不匹配,都有可能導(dǎo)致溶液的泄漏。請(qǐng)按照下面步驟將色譜柱與密封卡套相連接,從而將色譜柱接入HPLC系統(tǒng)中:(a)一次使用的管線,請(qǐng)依次將管線接頭和密封卡套裝在外徑1/16”的管線上。密封卡套的寬口端應(yīng)朝向管線接頭。( b)將管線緊緊插入色譜柱的接口,向前滑動(dòng)密封卡套和管線接頭,并使管線接頭的螺紋與色譜柱端口的螺紋相互銜接,然后擰緊管線接頭。如果管線為高分子材料,請(qǐng)轉(zhuǎn)到步驟(d);如果是金屬管線,請(qǐng)繼續(xù)(c)。( c)在用力將管線壓入柱端接口之后,用1/4”扳手將已擰緊的螺帽再進(jìn)一步緊固。(d)對(duì)色譜柱的另一端采用上述方法進(jìn)行操作。新的Polar-Phenyl柱中的液相是乙腈與水的混合溶液。在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過(guò)程中,硅膠填料可能會(huì)干涸。這時(shí)推薦用10-20倍柱體積的純有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈等進(jìn)行沖洗以活化色譜柱。接著可用用戶自己選擇的流動(dòng)相沖洗色譜柱。流速由0.1mL/min逐漸升至所需的操作條件,直至基線穩(wěn)定為止。如果柱壓和基線波動(dòng)較大,這可能是氣泡進(jìn)入了色譜柱中。這時(shí)可用較高流速?zèng)_洗色譜柱2-5分鐘, 例如4.6?150mm的色譜柱可采用流速2mL/min。樣品與流動(dòng)相: 為了避免堵塞色譜柱的堵塞,所有樣品和溶劑,包括緩沖溶液在內(nèi),都必須在使用前用0.45?m或0.2?m的濾膜過(guò)濾。Polar-Phenyl鍵合固定相具有非極性的特點(diǎn),盡管Polar-Phenyl可以用水系緩沖液作為流動(dòng)相,但還是使用混合有機(jī)溶液,如甲醇(或乙腈)的水溶液等作為流動(dòng)相。流動(dòng)相在使用前需要脫氣。一個(gè)簡(jiǎn)單的脫氣方法是將流動(dòng)相在由水泵形成的真空下超聲5min。當(dāng)Polar-Phenyl柱用于梯度洗脫時(shí),起始流動(dòng)相通常為5%甲醇(或乙腈)。色譜柱的保養(yǎng) pH 避免在pH低于2或高于9的條件下使用Polar-Phenyl柱。較高的pH會(huì)溶解硅膠,從而使部分或全部的Phenyl鏈從硅膠表面脫落,引起分離效率的降低和保留時(shí)間的改變。為了獲得的分離效果和延長(zhǎng)柱的使用壽命,請(qǐng)盡量使用pH在2-8.5范圍內(nèi)的流動(dòng)相。 壓力 盡管Polar-Phenyl柱可在高至5000psi的壓力下使用,但正常的操作壓力應(yīng)當(dāng)?shù)陀?000psi。長(zhǎng)時(shí)間在高壓下運(yùn)行會(huì)損壞色譜柱和輸液泵。由于壓力來(lái)源于流速,因此zui大流速將受制于系統(tǒng)所能承受的壓力。一般而言,柱壓會(huì)隨著色譜柱使用時(shí)間的增加而逐漸增加。壓力突然增加預(yù)示色譜柱入口端的篩板發(fā)生了堵塞。在這種情況下,建議將色譜柱反接后用適宜的溶劑進(jìn)行沖洗。 溫度 zui高操作溫度為60?C。長(zhǎng)時(shí)間在高溫(>75?C)下操作也會(huì)損壞色譜柱,這種情形在高的pH(>8.5)條件下特別突出。 儲(chǔ)藏 長(zhǎng)期不用時(shí),請(qǐng)不要讓水或緩沖液存留在色譜柱中。在替代緩沖液時(shí),請(qǐng)用至少20-30倍柱體積的50%甲醇(或乙腈)水溶液沖洗色譜柱,再用20-30倍柱體積的純有機(jī)溶劑如乙腈等進(jìn)行沖洗。每根色譜柱在運(yùn)輸過(guò)程中均會(huì)附有兩個(gè)可拆卸的堵頭。為了防止柱床干涸,請(qǐng)用堵頭塞緊色譜柱的兩端。![]() |
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