Sepax Polar-Propylamide色譜柱 益母草中水蘇堿分離專用柱。 Polar-Propy

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Sepax Polar-Propylamide色譜柱

益母草中水蘇堿分離專用柱。

Polar-Propylamide是為解決強極性藥物和小生物分子的分離而設計的一款親水作用色譜(HILIC)柱，以高純度具有良好機械穩(wěn)定性的硅膠為基質(zhì)，采用高純度的鍵合試劑，zui大限度實現(xiàn)硅膠表面覆蓋，確保了固定相的穩(wěn)定性。該填料為均一的球形顆粒，孔徑120Å，表面積300m2/g，由于鍵合了極性丙基酰胺基團，Polar-Propylamide柱可為極強性的化合物提供良好的保留。通過運用獨有的勻漿裝填技術裝填得到的HILIC柱柱床密度均一穩(wěn)定，可保證具有zui高的柱效。通過嚴格控制單分子層形成以及封尾的化學反應條件，可確保柱與柱之間有著可靠的重現(xiàn)性。
色譜柱安裝與操作
色譜柱在運輸過程中或在沒有使用時，它的兩端總是用堵頭進行密封。當將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時，首先移去兩端的堵頭。請注意將流動相流動的方向與柱上標記的方向保持一致。除非出于特殊考慮，例如為了清除堵在色譜柱入口端的臟污等而需要將色譜柱反接以進行沖洗時，建議用戶在接上色譜柱時一定要遵循柱上標記的方向。由于色譜柱的連接是整個色譜操作過程的一部分，如果密封卡套過緊，或安裝不合適，或者密封卡套與色譜柱端口不匹配，都有可能導致溶液的泄漏。請按照下面步驟將色譜柱與密封卡套相連接，從而將色譜柱接入HPLC系統(tǒng)中：
(a)一次使用的管線，請依次將管線接頭和密封卡套裝在外徑1/16”的管線上。密封卡套的寬口端應朝向管線接頭。
(b)將管線緊緊插入色譜柱的接口，向前滑動密封卡套和管線接頭，并使管線接頭的螺紋與色譜柱端口的螺紋相互銜接，然后擰緊管線接頭。如果管線為高分子材料，請轉(zhuǎn)到步驟(d)；如果是金屬管線，請繼續(xù)(c)。
(c)在用力將管線壓入柱端接口之后，用1/4”扳手將已擰緊的螺帽再進一步緊固。
(d)對色譜柱的另一端采用上述方法進行操作。
新的Polar-Propylamide柱中的液相是乙腈與水的混合溶液。在儲存和運輸過程中，硅膠填料可能會干涸。這時推薦用10-20倍柱體積的純有機溶劑如甲醇、乙腈等進行沖洗以活化色譜柱。接著可用用戶自己選擇的流動相沖洗色譜柱。流速由0.1mL/min逐漸升至所需的操作條件，直至基線穩(wěn)定為止。如果柱壓和基線波動較大，這可能是氣泡進入了色譜柱中。這時可用較高流速沖洗色譜柱2-5分鐘， 例如4.6´150mm的色譜柱可采用流速2mL/min。
樣品與流動相
為了避免堵塞色譜柱的堵塞，所有樣品和溶劑，包括緩沖溶液在內(nèi)，都必須在使用前用0.45mm或0.2mm的濾膜過濾。樣品的水溶液不宜直接進樣，而應該保證有機溶劑至少50%的比例。
HILIC柱的固定相是親水的，而且在一定pH值范圍內(nèi)是帶電荷的。和大多數(shù)其他液相色譜技術不同的是HILIC的部分流動相是作為固定相的一部分來起作用的，因此關鍵是要在流動相中保持一定量的水。比例保持在3-60%的水平。
提高流動相中有機溶劑的比例，會提高溶質(zhì)的保留。典型的HILIC流動相是由水和揮發(fā)性緩沖鹽溶液以及40-97%的乙腈組成的，這決定了HILIC和適合與質(zhì)譜檢測器(MS)或蒸發(fā)光散射檢測器(ELSD)聯(lián)用。其他幾種與水能混溶的極性有機溶劑也可以用于HILIC的分析。這些溶劑的洗脫強度與RPLC分析中的洗脫強度順序大體相反。乙腈是溶劑。
小心避免使用在高有機溶劑溶解度不好的磷酸鹽或其他緩沖鹽，以免產(chǎn)生沉淀損壞色譜柱。避免三氟乙酸和其他離子對試劑。
色譜柱的保養(yǎng)
pH 避免在pH低于2或高于8的條件下使用Polar-Propylamide柱。較高的pH會溶解硅膠，從而使部分或全部的Propylamide鏈從硅膠表面脫落，引起分離效率的降低和保留時間的改變。為了獲得的分離效果和延長柱的使用壽命，請盡量使用pH在2-8范圍內(nèi)的流動相。
壓力 盡管Polar-Propylamide柱可在高至5000psi的壓力下使用，但正常的操作壓力應當?shù)陀?000psi。長時間在高壓下運行會損壞色譜柱和輸液泵。由于壓力來源于流速，因此zui大流速將受制于系統(tǒng)所能承受的壓力。一般而言，柱壓會隨著色譜柱使用時間的增加而逐漸增加。壓力突然增加預示色譜柱入口端的篩板發(fā)生了堵塞。在這種情況下，建議將色譜柱反接后用適宜的溶劑進行沖洗。
溫度 zui高操作溫度為60°C。長時間在高溫(>75°C)下操作也會損壞色譜柱，這種情形在高的pH(>8.5)條件下特別突出。
儲藏 HILIC柱建議保存在有機溶劑和水或低濃度緩沖液的混合溶液中, 如：90/10(v)乙腈/10mM乙酸銨溶液，pH6.8。每根色譜柱在運輸過程中均會附有兩個可拆卸的堵頭。為了防止柱床干涸，請用堵頭塞緊色譜柱的兩端。

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