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Hylone SH30074.03馬血清 SH30074.03(北美)出現(xiàn)顏色或沉淀的問題

發(fā)布時(shí)間:2017-08-14瀏覽次數(shù):985返回列表

Hylone SH30074.03馬血清 SH30074.03(北美)出現(xiàn)顏色或沉淀的問題

炎炎夏熱,暑期特惠,恰逢立秋時(shí)刻,素爾生物作為生物試劑優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商,Hylone SH30074.03馬血清,批量到貨,質(zhì)量與原SH30406.02E澳洲源血清同等質(zhì)量,價(jià)格可見!購(gòu)買血清并有好禮相送,機(jī)會(huì)不多哦,趕快行動(dòng)吧!

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1、問:我用的是四季青的胎牛血清,56℃30分鐘滅活后出現(xiàn)了白色少量絮狀沉淀,是不是污染?還能不能 再用?血清的生產(chǎn)日期是2006年7月(現(xiàn)在是2007年6月11日)。

答:應(yīng)該問題不大。你可以取少量血清放入培養(yǎng)皿中,37℃過夜培養(yǎng)看看就知道是否污染了。血清中沉淀 物的出現(xiàn)有許多種原因,但普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。

2、問:我用MTT法測(cè)細(xì)胞的增殖,用DMSO裂解細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)把DMSO加入到孔中就會(huì)形成乳白色(用的含胎牛血 清的1640培養(yǎng)基,由于沒有離板子的離心機(jī),所以沒有去除培養(yǎng)基直接加的DMSO)。以前用含小牛血清的培養(yǎng)基沒有 看到有這種情況。該怎么解決?

答:為什么要用離心機(jī)離心呢?難倒你養(yǎng)的是懸浮細(xì)胞嗎?如果是貼壁細(xì)胞的話直接將MTT倒掉,再加DMSO 即可,我們就是這么做的,效果很好!并且測(cè)細(xì)胞的增殖的話如果不去掉MTT就加DMSO的話誤差應(yīng)該很大!有時(shí)不一定就是血清的原因,可能跟你的MTT放置的時(shí)間或以及其他成分有關(guān)!

Hylone SH30074.03馬血清 SH30074.03(北美)出現(xiàn)顏色或沉淀的問題原代培養(yǎng):

當(dāng)采用外科操作的方法將細(xì)胞從有機(jī)體中分離下來,然后置于合適的培養(yǎng)環(huán)境中,它們會(huì)附著、分裂和生長(zhǎng)。這稱為原代培養(yǎng)。

原代培養(yǎng)有兩種基本的方法。

種,使用外植塊,將小片的組織粘附到玻璃或經(jīng)處理的塑料培養(yǎng)瓶中,并浸于培養(yǎng)液中。幾天之后,單個(gè)細(xì)胞將從組織外植塊中移動(dòng)到培養(yǎng)瓶的表面或基質(zhì)中開始分裂生長(zhǎng)。

第二種方法,也是使用更廣泛的方法,通過在組織碎片中加入消化(蛋白水解)酶,如胰酶或膠原酶,消化成團(tuán)聚集的細(xì)胞從而加快這一步驟。終得到單細(xì)胞的懸液,然后將其置于含有培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),讓其繼續(xù)生長(zhǎng)分裂。這種方法成為酶解。

3、問:(1)GIBCO胎牛血清500ml,今天解凍后沒有混勻直接分裝,結(jié)果使得前面的幾管是清亮的,后面就 帶有棕色的,不知有沒有影響?估計(jì)有什么影響?前面的成分好還是棕色的成分好???

答:肯定有。還是重新混合重新分裝,我覺得有效成分會(huì)集中在棕顏色部分。

問:(2)為什么會(huì)出現(xiàn)棕色呢?

答:血清中的棕色多一些可能是因?yàn)榧t蛋白的含量高些的緣故吧。

問:(3)血清滅活之后可以存放嗎?我的是前天滅活的,但是沒有加到培養(yǎng)基里,而是放在冰箱里,那下次 可以直接用嗎?還是再次滅活???

答:當(dāng)然可以,如果多的話,分裝后放在-20℃,下次用時(shí)再解凍,也不用再滅活。用一管拿一 管,少許血清可以放在4℃。分裝時(shí)還要注意不要裝得太滿,以免溢出污染。

Hylone SH30074.03馬血清 SH30074.03(北美)出現(xiàn)顏色或沉淀的問題關(guān)于心肌細(xì)胞元代培養(yǎng)的FBS問題:

 (1)1%的血清完全培養(yǎng)基可不可以,得看你胰酶的用量。但是在心肌細(xì)胞元代培養(yǎng)就不行。 10%FBS完全 培養(yǎng)基效果都不太好,開始心肌細(xì)胞元代培養(yǎng)需要高濃度的FBS,20%左右,但這就有出現(xiàn)另一個(gè)問題,在FBS完全培 養(yǎng)基中,成纖維細(xì)胞呈細(xì)胞,須得在培養(yǎng)基加入適量的BrdU以抑制其生長(zhǎng),純化心肌細(xì)胞。

 (2)FBS的作用不僅僅是拿來中和胰酶,只是FBS中的一些蛋白質(zhì)如α-巨球蛋白等有抑制胰酶活性作用 。

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