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【BT-20（BT-20）細(xì)胞，人乳腺癌細(xì)胞】詳細(xì)說明：

細(xì)胞株名稱：BT-20（BT-20）細(xì)胞，人乳腺癌細(xì)胞

血清我們推薦用:澳洲源GibcoFBS：10099-141 或 HycloneFBS：SH30084.03。素爾血清專賣網(wǎng)：www.biosuer.com 在線！

培養(yǎng)條件：37.0C carbon dioxide(CO2),5%

BT-20（BT-20）細(xì)胞，人乳腺癌細(xì)胞傳代方法：收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(是在 4X 物鏡)觀察整個細(xì)胞生長情況。

（一）如果細(xì)胞未長滿，用 75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，

嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml 新鮮培養(yǎng)液后繼

續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細(xì)胞已長滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用 PBS（不含鈣,鎂離子）洗 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于

37℃培養(yǎng)箱 1-3 分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶 10-30 秒，在倒置顯微鏡下觀

察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶

后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加完全培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)

瓶中。如果沒有特別說明，收到細(xì)胞后的一次傳代一般是一傳二。

注：1、觀察細(xì)胞在低倍鏡（4 或 5X 物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判

斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請在 10 或 20 物鏡下。

2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍

存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到

新瓶內(nèi)。

4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請及時與

我們聯(lián)系。

凍存方法：凍存液：90%胎牛血清，10%DMSO

儲存：液氮儲存

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