SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞,耐DDP細(xì)胞

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SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞,耐DDP細(xì)胞 產(chǎn)品簡介:
【產(chǎn)品名稱】SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞,耐DDP細(xì)胞
【產(chǎn)品規(guī)格】25cm2 培養(yǎng)瓶
【說明書】說明書隨貨發(fā)送,您也可以直接聯(lián)系我司在線銷售人員索取
【運輸和保存】可選擇干冰運輸及發(fā)送
SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞,耐DDP細(xì)胞注意事項:
1、客戶收到細(xì)胞先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置半小時后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行拍照(建議收到細(xì)胞時的培養(yǎng)基拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100,200各兩張,拍攝照片應(yīng)清晰),排除細(xì)胞本身污染的情況;
質(zhì)粒是染色體外能夠進(jìn)行復(fù)制的遺傳單位,包括真核生物的細(xì)胞器和細(xì)菌細(xì)胞中染色體以外的脫氧核糖核酸(DNA)分子?,F(xiàn)在習(xí)慣上用來專指細(xì)菌、酵母菌和放線菌等生物中染色體以外的DNA分子。在基因工程中質(zhì)粒常被用做基因的載體。
2、細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿完全培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運輸?shù)霓k法。從細(xì)胞資源中心獲得細(xì)胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作。如有問題一時間跟我們聯(lián)系 !
SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞,耐DDP細(xì)胞傳代方法:
收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。
一.如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
二.如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6傳代;2~3天1次
SGC7901/DDP人胃癌細(xì)胞,耐DDP細(xì)胞常見問題及解決方案
1.何時須更換培養(yǎng)基?
視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本資料上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。
2.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活。
3.如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?
培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長??傊?,MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、 RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個好的開始。
4.培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用5 %或10% CO2?或根本沒有影響?
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7 g時,細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10 % CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5 g時,則應(yīng)使用5 % CO2培養(yǎng)細(xì)胞。
5.細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
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