產(chǎn)品簡介
RNeasy FFPE Kit專為從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA而設(shè)計(jì)
公司簡介
北京冬璞泰和科技有限責(zé)任公司 (Beijing Dongputaihe Technology Co.,LTD) 是一家專注于生命科學(xué)研究領(lǐng)域的高科技企業(yè) 。公司以“聚焦生命科學(xué),發(fā)展科研技術(shù)”為中心理念,為廣大科學(xué)工作者提供包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、蛋白組學(xué)、臨床診斷等領(lǐng)域的試劑、耗材、抗體、儀器等相關(guān)產(chǎn)品,其服務(wù)行業(yè)涵蓋生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、臨床疾病診斷與控制、生物制品的開發(fā)與應(yīng)用、制藥、商品檢驗(yàn)檢疫、人口與健康、食品安全以及農(nóng)林牧漁等諸多領(lǐng)域,面向客戶群體有各大醫(yī)學(xué)院、醫(yī)科大學(xué)、生命科學(xué)院、農(nóng)林業(yè)大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫部門、檢驗(yàn)檢疫部門、公安系統(tǒng)、制藥公司、生物技術(shù)公司等單位。
冬璞泰和 與國內(nèi)外各大生物領(lǐng)域保持密切合作關(guān)系,憑借深厚的行業(yè)人脈和豐富的專業(yè)經(jīng)驗(yàn)為廣大科研用戶提供更強(qiáng)大的技術(shù)支持和產(chǎn)品動態(tài)。
冬璞泰和 注重用心與客戶溝通,定期學(xué)習(xí)先進(jìn)技術(shù),積極建立完善及系統(tǒng)的市場網(wǎng)絡(luò),使公司能穩(wěn)健地持續(xù)發(fā)展;力求用專業(yè)化,簡單化,快速化的服務(wù),幫助人們享受健康的生活。
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產(chǎn)品說明

從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA
- 創(chuàng)新的方法用于克服福爾馬林造成的交聯(lián)
- 有效的釋放RNA而不破壞其完整性
- 的實(shí)驗(yàn)方案,在85分鐘內(nèi)即可獲得純化的RNA
RNeasy FFPE Kit專為從福爾馬林固定、石蠟包埋的組織切片中純化總RNA而設(shè)計(jì)。獨(dú)特的裂解和孵育條件逆轉(zhuǎn)福爾馬林對RNA的修飾。并且裂解緩沖液可將RNA從組織切片中有效釋放出來,防止RNA的進(jìn)一步降解。試劑盒同樣使用DNase和DNase Booster Buffer優(yōu)化,去除基因組DNA的污染。使用RNeasy MinElute離心柱純化獲得的總RNA,洗脫體積可小至10 μl。整個純化流程可在QIAcube全自動核酸純化儀上全自動進(jìn)行。
性能
使用RNeasy FFPE Kit從固定和包埋的樣本中純化獲得的RNA的產(chǎn)量比用其他方法更高(參見Greater yields of RNA)?;厥盏玫降耐暾鸕NAzui小可達(dá)70 nt,并且?guī)缀鯖]有基因組DNA的污染(參見Recovery of all usable RNA)。用該試劑盒從FFPE樣本中純化得到的RNA片段非常適用于real-time RT-PCR等敏感的下游應(yīng)用(參見Reliable results in real-time RT-PCR analysis和Successful real-time RT-PCR analysis)。
原理
用福爾馬林固定組織會導(dǎo)致RNA-RNA和RNA-蛋白質(zhì)的交聯(lián),這會影響RNA在酶學(xué)分析中的性能。FFPE樣本固定和包埋同樣會導(dǎo)致核酸的嚴(yán)重片段化。RNeasy FFPE Kit提供了獨(dú)特的裂解和孵育條件來逆轉(zhuǎn)福爾馬林對RNA的修飾。裂解緩沖液能使RNA從FFPE組織樣本中有效釋放,并防止進(jìn)一步的RNA降解。經(jīng)優(yōu)化的條件能純化得到所有可用的RNA,使用RNeasy FFPE Kit從FFPE樣本中得到的RNA的產(chǎn)量比其他方法更高。
操作流程
整個RNeasy FFPE操作流程可在85分鐘內(nèi)完成(參見RNeasy FFPE procedure)。使用蛋白酶K裂解樣本僅需15分鐘。裂解后,樣本在80ºC下孵育15分鐘。之后,用DNase處理能有效去除樣本中的基因組DNA,包括小的DNA片段。后,使用RNeasy MinElute離心柱即可收集純化的RNA,洗脫體積14–30 µl。純化過程可在QIAcube全自動核酸純化儀上全自動進(jìn)行。
應(yīng)用
RNeasy FFPE Kit可純化FFPE 樣本中所有大于70 nt RNA,得到適用于RT-PCR等眾多下游應(yīng)用的RNA片段。但是,從FFPE樣本中純化得到的RNA會嚴(yán)重片段化,不能用于需要完整RNA的下游應(yīng)用。如果使用片段化RNA可能需要做些修飾(例如在RT-PCR時設(shè)計(jì)小的擴(kuò)增子)。進(jìn)行cDNA合成時,不能使用oligo-dT引物,而要使用隨機(jī)或基因特異性引物。
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