ETMcAb4F11細胞培養(yǎng)基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS生長特性 半貼壁生長

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ETMcAb4F11細胞凍存時使用的DMEM培養(yǎng)基，復蘇時使用MEM培養(yǎng)基，第二天發(fā)現復蘇不成功，細胞沒有貼壁，我又重新離心之后加入DMEM培養(yǎng)基，請問大神對細胞有影響嗎？？之后是否可以貼壁生長？

資源名稱 ETMcAb4F11
種屬 7
形態(tài) 淋巴母細胞樣
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
生長特性 半貼壁生長

這兩個培養(yǎng)基成分差距不大，大部分細胞換用應該沒什么影響。ETMcAb4F11細胞復蘇不貼壁的話可能是：1.凍存細胞有問題，比如凍存細胞狀態(tài)不是很好，凍存降溫過快等；2.復蘇細胞有問題，比如融化速度過慢，離心時間和轉速有問題；3.細胞本身特性，有些細胞貼壁很慢，過夜不一定會都貼壁，這種情況不動是的，再離心的話細胞貼壁只會更慢。

ETMcAb4F11細胞爬片的步驟：

1 什么是細胞爬片？其用途是什么？

2 細胞爬片的步驟是怎樣的？

3 細胞爬片需要哪些實驗材料和儀器？

細胞爬片就是讓細胞（貼壁細胞）在片子（蓋玻片）上生長。主要用來做免疫細胞化學啊，原位雜交等吧。在做這些實驗時，制作標本有兩種，一是離心做細胞涂片，二是細胞爬片。利用貼壁ETMcAb4F11細胞在玻璃等物質上貼壁生長的特點，讓它在蓋玻片上生長，可以使制作的細胞片子更牢固，在后面的洗滌過程中，不易脫落。特別是在用粘附劑如多聚賴安酸處理過的片子上，細胞貼得更牢固。

細胞爬片：將片子放在細胞培養(yǎng)板（均已經消毒）中，加入一定數量的細胞懸液，讓它生長24小時。待它貼壁后，細胞爬片就制作好了。

需要的器材：多聚賴安酸、合適大小的蓋玻片（根據細胞培養(yǎng)板孔大小而定）、細胞培養(yǎng)板、培養(yǎng)基。

 

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