RNase R（Ribonuclease R）是一種來源于大腸桿菌RNR超家族的3’-5’核糖核酸外切酶，可從3’-5’方向?qū)NA逐步切割成二核苷酸和三核苷酸。RNase R可消化幾乎所有的線性RNA分子，但不易消化環(huán)形RNA、套索結(jié)構(gòu)或3’突出末端少于7個核苷酸的雙鏈RNA分子。

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廣州安邦生物科技有限公司（Guangzhou abbiotechnology, Inc.）成立于2011年6月，坐落于廣州市天河區(qū)怡祥大地公園，擁有400多平米的現(xiàn)貨試劑耗材及儀器倉庫，擁有專業(yè)的試劑冷庫及配套冷鏈物流配送服務，是一家華南地區(qū)專業(yè)提供生命科學實驗室產(chǎn)品和服務的供應商。公司主營業(yè)務涉及生物技術(shù)、生物醫(yī)藥、分子診斷、分析檢測等領(lǐng)域，現(xiàn)階段產(chǎn)品涵蓋了細胞生物學、免疫學、分子生物學、表觀遺傳學、蛋白純化、生化試劑等，產(chǎn)品線日趨完善。

安邦生物核心團隊皆是從事生物技術(shù)行業(yè)多年的資深人士，專業(yè)為客戶提供個性化和定制化的一站式科研實驗室產(chǎn)品解決方案，以及穩(wěn)定可靠的技術(shù)支持與售后服務。

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RNase R（Ribonuclease R）是一種來源于大腸桿菌RNR超家族的3’-5’核糖核酸外切酶，可從3’-5’方向?qū)NA逐步切割成二核苷酸和三核苷酸。RNase R可消化幾乎所有的線性RNA分子，但不易消化環(huán)形RNA、套索結(jié)構(gòu)或3’突出末端少于7個核苷酸的雙鏈RNA分子。

RNase R是circRNA的富集和鑒定實驗必備工具酶，可消化線性RNA以使環(huán)形RNA(circRNAs)或套索結(jié)構(gòu)RNA(lariat RNA)得到富集。

RNase R消化RNA示意圖

應用場景

circRNA的富集：高通量測序是大批量發(fā)現(xiàn)circRNA最快捷的方法，需要對circRNA進行富集，此時RNase R消化就是必須的。

circRNA的鑒定：根據(jù)RNase R(+)和RNase R(-)組中是否檢測到條帶來證明檢測的分子是circRNA。

產(chǎn)品特征

特異性：特異性消化線性RNA

高效、快速：5-15min即可消化大部分線性RNA

buffer兼容性：消化產(chǎn)物可直接用于下游逆轉(zhuǎn)錄

使用方便：2種試劑，1步反應

產(chǎn)品信息

名稱	貨號	規(guī)格	目錄價（元）	保存溫度
Ribonuclease R（RNase R)	R0301	500 U	2280	-20℃
	R0302	5000 U	詢價	-20℃

標準反應體系下，于 37℃，10 min 將 1 μg poly(A)轉(zhuǎn)化成酸溶核苷酸所需的酶量定義為一個活力單位(U)。

產(chǎn)品組分

Storage Buffer	50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.1% Triton® X-100, 50% Glycerol
10X Reaction Buffer	200 mM Tris-HCl (pH 8.0), 1 M KCl, 1 mM MgCl2

反應體系

        20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 0.1 mM MgCl2, 37℃孵育。

        注：1）RNase R 在 0.1-0.5 mM Mg²⁺存在時活性最高，反應中 EDTA 可能降低 RNase R 活性，此時可額外添加 MgCl2 使 Mg²⁺ 濃度最高達到 0.5 mM。2）孵育后可于 70℃，10 min 使酶失活，再進行下游實驗（如逆轉(zhuǎn)錄）；也可不滅活，直接純化后進行下游實驗。

質(zhì)量控制

        SDS-PAGE 檢測純度>99%；Total RNA 經(jīng) RNase R 消化后進行 RT-qPCR 檢測，線性 RNA 豐度明顯降低， 環(huán)形RNA 豐度基本不變。

性能比較：RNA電泳檢測

將10U RNase R加入到2.5 μg total RNA中，于37℃孵育30 min，之后直接進行電泳檢測，結(jié)果顯示RNase R+組28/18/5S條帶變淡（不可見），表明RNase R對total RNA的消化作用。吉賽和公司e或公司a的RNase R對total RNA消化效果相當。

性能比較：qRT-PCR檢測

將10U RNase R加入到2.5 μg total RNA中，于37℃孵育30 min，之后進行RT-qPCR實驗，結(jié)果顯示RNase R+ 組中hsa_circFOXO3_002和hsa_circMTO1_001的豐度基本不變，表明環(huán)形RNA耐受RNase R的消化。吉賽和公司e或公司a的RNase R效果相當。

注：數(shù)據(jù)計算以“RNase R+吉賽”組為對照，設(shè)定其相對豐度值為1。

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