ALH083 無內毒素質粒中量提取試劑盒

產品簡介
無內毒素質粒中量提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持,本品用于科研目的,本品質量穩(wěn)定,價位合理,需要無內毒素質粒中量提取試劑盒等DNA提取純化產品的客戶,請到我公司官網聯(lián)系我們。...
產品詳細介紹
特別提示:包括無內毒素質粒中量提取試劑盒在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產品名稱:無內毒素質粒中量提取試劑盒
英文名稱:Plasmid Extraction Kit (solution type, no endotoxin, transfection grade)
產品貨號:ALH083
產品規(guī)格:20次
本試劑盒適用于中量高純或者轉染級質粒制備和BAC/PAC大型質粒制備。用堿裂解法從培養(yǎng)菌中提取質粒DNA,采用獨特的溶液配方和內毒素清除試劑,只需要幾次簡單離心去除蛋白質、多糖、內毒素、RNA等雜質,獲得高質量的質粒DNA。純化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的質??芍苯討糜诩毎D染甚至動物體內實驗等對DNA純度要求很高的工作中。純化后期過程均在Eppendorf管中操作,方法簡單,不需特殊設備,無需過柱,不用酚氯fǎng抽提;基本可完全回收細菌裂解釋放出的質粒,不必擔心質粒DNA的丟失。本方法提取純化質粒DNA,對質粒損傷小,即使是10kb甚至100kb以上的大型質?;蛐虰AC/PAC質粒,只要堿裂解法能夠提取,就可以有效純化??蛇x擇任意小體積溶解質粒,濃度可高達3μg/μl。
試劑盒組份(20次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75
溶液P1—————————————65ml
溶液P2—————————————50ml
溶液PⅢ-————————————50ml
雜質清除劑A-——————————1.5ml
雜質清除劑B-——————————15ml
內毒素清除劑——————————5ml
試劑盒特點:
1.不需要使用有毒的苯酚,氯fǎng等試劑,也不需要乙醇沉淀??焖?、 方便、從50-70 ml大腸桿菌LB((Luria-Bertani)培養(yǎng)液中,可快速提取100μg -250μg純凈的高拷貝質粒DNA,提取率達80-90 %。
2.獲得的質粒產量高,濃度高,超螺旋比例高,純度好,可直接用于酶切、轉化、PCR、體外轉錄、測序等各種分子生物學實驗。
3.內毒素含量低(<0.1 EU/μg DNA),可直接應用于細胞轉染。
注意事項
1. 提取的質粒量與細菌培養(yǎng)濃度、質??截悢?shù)等因素有關。如果所提質粒為低拷貝質粒或大于10kb 的大質粒,應加大菌體使用量,同時按比例增加P1、P2、PⅢ的用量。
2. 提取大質粒時操作動作要輕柔,應該使用剪大了開口的吸頭,防止機械剪切對DNA 的損壞。
3. DNA 沉淀液沉淀離心后,可能看不到明顯沉淀。如未見沉淀,擔心DNA 丟失,可保留上清液,待完成全部操作后電泳鑒定,以確定是否獲得終產物(數(shù)百微克DNA 離心沉淀在管的側壁上,可能無法看到明顯團塊)。
4. 得到的質粒DNA 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260值為1 相當于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶,也可能為2 條或者多條DNA 條帶,這主要是不同程度的超螺旋構象質粒泳動位置不一造成,與提取物培養(yǎng)時間長短、提取時操作劇烈程度等有關。本公司產品正常操作情況下基本超螺旋可以超過95%。
5. 質粒DNA 確切分子大小, 必須酶切線性化后,對比DNA分子量Marker才可以知道。處于環(huán)狀或者超螺旋狀態(tài)的質粒,泳動位置不確定,無法通過電泳知道確切大小。
儲存條件:室溫,有效期12個月。
本制品別名:細胞轉染用質粒制備試劑盒|高純度質粒重量提取試劑盒|細胞轉染質粒提取試劑盒|無內毒素培養(yǎng)菌質粒提取試劑盒
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