BTN100935 超純水

產(chǎn)品簡介
北京百奧萊博供應(yīng)的超純水僅用于生物化學(xué)研究方面,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多超純水等RNA提取純化產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括超純水在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:超純水
英文名稱:Ultrapure Water
產(chǎn)品貨號:BTN100935
產(chǎn)品規(guī)格:250mL
本品是指將水中的導(dǎo)電介質(zhì)幾乎全部去除,又將水中不離解的膠體物質(zhì)、氣體和有機(jī)物均去除至很低程度的水??梢杂糜诟鞣N分子生物學(xué)實驗。
儲存條件:常溫運輸和保存、有效期兩年。
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本試劑盒專門從各種軟骨組織樣品中快速提取總RNA的試劑盒,它能有效克服傳統(tǒng)TRIzol方法提取軟骨組織RNA時,十分容易產(chǎn)生糖蛋白和酸性多糖污染這一缺點。
試劑盒特點:
1. 能有效去除糖蛋白、粘蛋白污染,OD260/280一般均在1.9以上。
2. RNA產(chǎn)率一般為5-15μg/100mg。
3. 操作簡單,整個提取過程一般只需要10 多分鐘。
4. 得到的RNA可以直接用于RT-PCR、Northern雜交、mRNA 純化、Primer Extension、RNA Protection、in vitro translation等研究。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
溶液A | 50ml |
溶液B | 15ml |
溶液C | 50ml |
離心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
RNA 洗脫液 | 10ml |
說明書 | 1份 |
儲存條件:常溫運輸和保存,有效期一年。溶液B需4℃保存。
使用方法:
1. 先將50-200mg 新鮮或冷凍的軟骨組織液氮研磨成粉,加入1mL溶液A溶解(溶液A使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并搖晃混勻),然后將研磨物轉(zhuǎn)移到新的1.5mL離心管中,振蕩混合30秒。也可以將軟骨組織剪碎后與溶液A一起用Polytron 勻漿機(jī)(內(nèi)切式勻漿機(jī))勻漿5-20秒,再轉(zhuǎn)移到1.5mL離心管中。勻漿時會產(chǎn)生泡沫,但不影響提取效果。
2.在離心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自備lǜ仿,在振蕩器上振蕩30秒混勻,此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。
3.室溫12000~15000g離心3~5分鐘,兩相間將有約5-10 毫米厚的細(xì)胞破碎物。
4. 將上清液(約0.6mL)轉(zhuǎn)移到另一干凈的1.5mL塑料離心管中,下層有機(jī)相和中間層含有DNA、蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì),避免觸及或吸取。zuì好留下100μl上清液不取。
5. 加入等體積的溶液C,充分顛倒混勻。
6. 將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12000~15000g室溫離心半分鐘,棄穿透液。
7. 將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,12000~15000g室溫離心半分鐘,棄穿透液。
8. 加0.7mL 通用洗柱液,室溫離心半分鐘,棄穿透液。
9. 加0.3mL 通用洗柱液,室溫離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。
10.室溫離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會影響RNA的使用。
11. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到自備的RNase-free離心管中,加入50-100μl RNA洗脫液,室溫放置1-2分鐘。
12. 12000~15000g室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的電泳檢測:如果需要做Northern雜交,強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳,因為非變性膠不能分離所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測定:將5-10μl RNA 溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2 之間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度(1 OD260的RNA=40μg/mL),進(jìn)而計算出RNA的產(chǎn)量(濃度X 體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。注意:測定OD時不要稀釋過度,否則濃度會在儀器能測的范圍之外。本方法提取的RNA 測OD時一般zuì多只能稀釋10-20倍。
15. RNA 純度測定:無污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。
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