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產(chǎn)品詳情

HR0241 細(xì)胞漿/胞核分離試劑盒

  • 產(chǎn)品/服務(wù):HR0241 細(xì)胞漿/胞核分離試劑盒
  • 型 號(hào):HR0241
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價(jià):面議 
  • 更新日期:2023-08-24
  • 有效期至:長(zhǎng)期有效
  • 瀏覽次數(shù):972
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

細(xì)胞核/胞漿分離試劑盒可以從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分離細(xì)胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個(gè)系統(tǒng),維持核和胞漿組分是分開和完整的。優(yōu)化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿,而幾乎沒有交叉污染。本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能,適合下游分析如轉(zhuǎn)錄活性,RNA拼接,gel-shift分析,報(bào)告分析,酶活性分析和...

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

細(xì)胞漿/胞核分離試劑盒

 

產(chǎn)品編號(hào):HR0241

產(chǎn)品組成:

組份

50T

100T

組分A:提取液A

20mL

40mL

組分B:核保存液B

10mL

20mL

組分C:蛋白酶抑制劑混合物

100μL

200μL

細(xì)胞漿/胞核分離試劑盒保存條件:

提取液、核保存液2-8℃保存;蛋白酶抑制劑-20℃保存。有效期1年。

【注】:

● 蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。

● 蛋白酶抑制劑在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。

● 試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完。

產(chǎn)品說明:

細(xì)胞核/胞漿分離試劑盒可以從哺乳動(dòng)物細(xì)胞中分離細(xì)胞核和胞漿組分。此試劑盒提供了一個(gè)系統(tǒng),維持核和胞漿組分是分開和完整的。優(yōu)化的試劑配方和程序可以快速分離胞核和胞漿,而幾乎沒有交叉污染。

本試劑盒提取的胞核和胞漿組分仍保持其生化功能,適合下游分析如轉(zhuǎn)錄活性,RNA拼接,gel-shift分析,報(bào)告分析,酶活性分析和WB等。

試劑盒以外自備試劑和儀器:

● 離心機(jī) ● 振蕩器 ● 渦旋混勻器 ● PBS ● 蛋白定量試劑盒

使用注意事項(xiàng):

● 預(yù)實(shí)驗(yàn)很重要。必須要做預(yù)實(shí)驗(yàn),在正式實(shí)驗(yàn)之前取少量樣本優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,并像正式樣本一樣認(rèn)真進(jìn)行,看實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否可行,實(shí)驗(yàn)條件是否適合自己的樣本。由于生物樣本的多樣性,不同贗本的實(shí)驗(yàn)條件通常差異較大,同種細(xì)胞的不同模型下需要的實(shí)驗(yàn)條件也可能不同,為了避免浪費(fèi)正式樣本和試劑,一定要提前預(yù)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件。

● 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。

● 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。

● 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀,不影響使用,溶解后正常使用。

● 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。

細(xì)胞漿/胞核分離試劑盒使用方法:

1、取5-10×106個(gè)細(xì)胞,在4℃,500×g條件下離心3分鐘,小心吸取培養(yǎng)基,盡可能吸干,收集細(xì)胞。

2、用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次,每次洗滌后盡可能吸干上清。

【注】:

● 在4℃,500×g條件下離心5分鐘。

3、在細(xì)胞沉淀中加入400μL冷的提取液A,渦旋振蕩混勻或吹打混勻,置冰上振蕩20-30分鐘。

● 使用振蕩器/搖床的較低轉(zhuǎn)速,提取液能輕微晃動(dòng)即可。

● 如果沒有振蕩條件,也可冰上靜置,稍微延長(zhǎng)處理時(shí)間,中間每隔5分鐘渦旋振蕩或移液器吹打混勻。

● 細(xì)胞數(shù)量根據(jù)實(shí)驗(yàn)情況調(diào)整,每次的提取液用量并不是一定的,大約為細(xì)胞體積的5-10倍即可,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整。

● 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要在每400μL提取液A中加入2μL蛋白酶抑制劑。

4、在4℃,1200×g條件下離心5分鐘。

5、將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管,即得到胞漿組分,請(qǐng)置冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

6、沉淀用PBS重懸,然后在4℃,2000×g 條件下離心5分鐘,棄上清。

7、沉淀為細(xì)胞核組分,將沉淀用200μL保存液B 重懸后保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。


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