產(chǎn)品簡介
從細胞/組織樣本中純化不含苯酚的總RNA，配有基因組DNA去除柱獨特的gDNA Eliminator柱，無需DNase處理 數(shù)分鐘內(nèi)得到高品質(zhì)RNA，提取流程方便快捷 產(chǎn)物RNA不含苯酚 RNA在敏感的下游應(yīng)用中表現(xiàn)出色，如real-time RT-PC
公司簡介
北京冬璞泰和科技有限責任公司 （Beijing Dongputaihe Technology Co.,LTD) 是一家專注于生命科學(xué)研究領(lǐng)域的高科技企業(yè) 。公司以“聚焦生命科學(xué)，發(fā)展科研技術(shù)”為中心理念，為廣大科學(xué)工作者提供包括分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)、蛋白組學(xué)、臨床診斷等領(lǐng)域的試劑、耗材、抗體、儀器等相關(guān)產(chǎn)品，其服務(wù)行業(yè)涵蓋生命科學(xué)基礎(chǔ)研究、臨床疾病診斷與控制、生物制品的開發(fā)與應(yīng)用、制藥、商品檢驗檢疫、人口與健康、食品安全以及農(nóng)林牧漁等諸多領(lǐng)域，面向客戶群體有各大醫(yī)學(xué)院、醫(yī)科大學(xué)、生命科學(xué)院、農(nóng)林業(yè)大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫部門、檢驗檢疫部門、公安系統(tǒng)、制藥公司、生物技術(shù)公司等單位。
冬璞泰和 與國內(nèi)外各大生物領(lǐng)域保持密切合作關(guān)系，憑借深厚的行業(yè)人脈和豐富的專業(yè)經(jīng)驗為廣大科研用戶提供更強大的技術(shù)支持和產(chǎn)品動態(tài)。
冬璞泰和 注重用心與客戶溝通，定期學(xué)習先進技術(shù)，積極建立完善及系統(tǒng)的市場網(wǎng)絡(luò)，使公司能穩(wěn)健地持續(xù)發(fā)展；力求用專業(yè)化，簡單化，快速化的服務(wù)，幫助人們享受健康的生活。
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產(chǎn)品說明
從細胞/組織樣本中純化不含苯酚的總RNA，配有基因組DNA去除柱
- 獨特的gDNA Eliminator柱，無需DNase處理
- 數(shù)分鐘內(nèi)得到高品質(zhì)RNA，提取流程方便快捷
- 產(chǎn)物RNA不含苯酚
- RNA在敏感的下游應(yīng)用中表現(xiàn)出色，如real-time RT-PCR和RNA-Seq
RNeasy Plus Kits將快速方便的RNA純化步驟和有效去除基因組DNA污染整合在一起。使用該試劑盒能夠從多種培養(yǎng)細胞和易裂解組織中純化獲得高純度、高產(chǎn)量RNA。RNeasy Plus Mini Kit 一次能夠純化獲得100 µg總RNA（〉200 nt），并且去除基因組DNA。RNeasy Plus Micro Kit則適用于樣本量較少的情況，可分離獲得45 µg總RNA。該試劑盒可在QIAcube全自動核酸純化儀上實現(xiàn)自動操作，可用RNA
later RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的穩(wěn)定組織樣本。
性能
使用RNeasy Plus技術(shù)從細胞和組織中提取RNA，產(chǎn)物不含基因組DNA，產(chǎn)量高、可重復(fù)性好，適用于敏感的下游應(yīng)用（參見Effective cell genomic DNA removal, Effective tissue genomic DNA removal, High, reproducible RNA yields和Array-ready RNA）。從組織和培養(yǎng)細胞中提取的RNA完整性Agilent RIN數(shù)值接近10。
該試劑盒純化產(chǎn)物不含短于200個核苷酸的RNA（如rRNA和tRNA），因此有富集mRNA的效果。如需從培養(yǎng)細胞中分離獲得含有小RNA（如miRNA）的總RNA，我們提供專門的分離方案作為補充，請參見產(chǎn)品使用手冊。
原理
細胞和易裂解組織先在含有異硫氰酸胍的高變性Buffer RLT Plus中裂解和勻質(zhì)化，能使RNases立即失活，以保證分離到完整的RNA。裂解液再流過gDNA Eliminator柱。該離心柱與高鹽緩沖液共同作用，可選擇性的去除基因組DNA。加入乙醇以提供RNA結(jié)合的合適條件，樣本再加入到RNeasy離心柱。含有硅膠膜的特制離心柱能特異性的結(jié)合裂解細胞中的RNA。
對于多脂和難裂解組織，推薦使用RNeasy Plus Universal Kits。對于高通量的總RNA純化，推薦使用RNeasy Plus 96 Kit。如需從其他類型樣本中分離含有miRNA的總RNA，推薦使用miRNeasy Kits。
操作流程
RNeasy Plus Micro Kit能從多達5 x 105個細胞或5 mg組織中分離總RNA，RNeasy Plus Mini Kit能夠從107個細胞或30 mg組織中分離總RNA。簡潔的工作流程可在25分鐘內(nèi)純化得到已去除基因組DNA的RNA。樣本先被裂解和勻質(zhì)化。裂解液流過gDNA Eliminator柱，在流過gDNA Eliminator柱的溶液中加入乙醇，樣本再上樣到RNeasy離心柱。RNA結(jié)合到膜上，污染物被洗去。獲得高品質(zhì)RNA，RNeasy Plus Micro Kit的洗脫體積為14 µl，RNeasy Plus Mini Kit的洗脫體積為30 µl。
處理不同的起始樣本可用不同的實驗方案。實驗方案的不同之處主要在于樣本的裂解和勻質(zhì)化。樣本上樣到gDNA Eliminator柱之后的步驟就類似。
使用Buffer RLT Plus（RNeasy Plus Micro Kit提供）進行組織破碎和勻質(zhì)化時，可能會產(chǎn)生過多泡沫。在破碎和勻漿前向Buffer RLT Plus中加入Reagent DX（單獨提供）可充分減少泡沫產(chǎn)生。Reagent DX經(jīng)仔細檢測，表明配合此試劑盒使用不會影響RNA的純度或下游應(yīng)用。
應(yīng)用
RNeasy Plus Kit純化得到的RNA適合對少量DNA污染敏感的下游應(yīng)用，如定量real-time RT-PCR和RNA-Seq。純化得到的RNA還可用于其他應(yīng)用。
RNeasy Plus Micro Kit適用于小樣本，包括：
- 激光顯微切割冰凍切片
- 細針穿刺
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