特別提示:包括Western及IP細胞裂解液在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:Western及IP細胞裂解液
英文名稱:Cell lysis buffer for Western and IP
產(chǎn)品貨號:YT038
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
本品是一種在非變性條件下裂解細胞的裂解液。本細胞裂解液裂解的細胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。
Western及IP細胞裂解液的主要成分為20mM Tris(pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白的降解,并維持原有的蛋白間相互作用。
用Western及IP細胞裂解液裂解得到的蛋白樣品,可以用百奧萊博的BCA蛋白濃度測定試劑盒(YT036,YT037)測定蛋白濃度。由于含有較高濃度的Triton X-100等干擾物質(zhì),不能用Bradford法測定由本裂解液裂解得到樣品的蛋白濃度。
儲存條件:-20℃,有效期一年。
根據(jù)您的關(guān)注的
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名稱:L-谷胱甘肽(還原型)
貨號:BTN120705
規(guī)格:5g
還原型谷胱甘肽是人類細胞質(zhì)中自然合成的一種肽,由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸組成,含有巰基(-SH),廣泛分布于機體各器官內(nèi),作為一種抗氧化劑,可以保護肝臟細胞膜,增強肝臟的解毒能力,為維持細胞生物功能呈有重要作用。本產(chǎn)品可用于配制純化GST標簽蛋白的洗脫液。
儲存條件:常溫運輸,4℃保存,有效期兩年。
名稱:糖蛋白染色試劑盒
貨號:BTN131075
規(guī)格:10次
本產(chǎn)品為在SDS-PAGE凝膠或蛋白免疫印記硝酸纖維素膜上檢測糖蛋白的試劑盒。該方法使用三種試劑,所需時間僅需不到兩小時,而其他的染色方法需要四到五小時。染色后的糖蛋白為品紅色條帶,背景為淺粉色或者無色。
產(chǎn)品特點:
1.包括一種陽性對照蛋白及一種陰性對照蛋白。
2.簡潔、易儲存的試劑盒。
3.本產(chǎn)品足夠10張mini-PAGE膠或20張8×8cm蛋白免疫印記硝酸纖維素膜染色。
產(chǎn)品組成:
成分
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規(guī)格
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氧化試劑
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2.5g
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糖蛋白染色試劑
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250ml
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還原試劑
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1.25g
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陽性對照(辣根過氧化物酶)
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1mg
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陰性對照(大豆胰蛋白酶抑制劑)
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1mg
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說明書
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1份
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儲存條件:常溫運輸,4℃保存,有效期一年。
自備試劑:0.9%NaCl溶液或PBS緩沖液、BCA工作液。
使用方法:
實驗前準備
1.配制3%乙酸溶液:將30mL冰醋酸與970mL超純水混勻,室溫保存?zhèn)溆谩?br />
2.配制50%甲醇溶液:將250mL甲醇與250mL超純水混勻,室溫保存?zhèn)溆谩?br />
3.配制氧化試劑:向氧化試劑干粉中加入250mL的3%乙酸溶液,充分混勻溶解后得到氧化試劑溶液,室溫保存?zhèn)溆谩?br />
4.配制還原試劑:向還原試劑干粉中加入250mL的超純水,充分混勻溶解后得到還原試劑溶液,室溫保存?zhèn)溆谩?br />
5.配制陽性對照(辣根過氧化物酶):向1mg固體中加入0.5mL超純水,使得溶液濃度為2mg/mL。用SDS-PAGE上樣緩沖液將溶液稀釋到終濃度為1mg/mL。對于80mm×80mm的凝膠來說,每個泳道加5到10μl的陽性對照。將配制好的陽性對照分裝后-20℃保存。
6.配制陰性對照(大豆胰蛋白酶抑制劑):向1mg固體中加入0.5mL超純水,使得溶液濃度為2mg/mL。用SDS-PAGE上樣緩沖液將溶液稀釋到終濃度為1mg/mL。對于80 mm×80 mm的凝膠來說,每個泳道加5到10μl的陰性對照。將配制好的陰性對照分裝后-20℃保存。
7.樣品稀釋:用SDS-PAGE上樣緩沖液將樣品濃度稀釋為1mg/mL,對于80mm×80mm的凝膠來說,每個泳道加5到10μl的樣品。
凝膠染色的操作步驟(注意:請在通風(fēng)櫥中進行以下操作)
1.取出電泳后的SDS-PAGE凝膠,加入到100mL 50%甲醇溶液中,完全浸泡30分鐘后,倒出甲醇溶液。
2.用100mL 3%乙酸溶液洗滌膠塊兩次,每次輕輕振蕩10分鐘。
注:如有需要,此步的膠塊可在超純水中4℃過夜處理。
3.將膠塊轉(zhuǎn)移到25mL氧化試劑中,輕輕振蕩15分鐘。
4.用100mL 3%乙酸溶液洗滌膠塊3次,每次輕輕振蕩5分鐘。
5.將膠塊轉(zhuǎn)移到25mL糖蛋白染色試劑中,輕輕振蕩15分鐘。
注:若染色試劑中有晶體析出,只需離心取上清液去除晶體即可,不要加熱來溶解晶體。
6.將膠塊轉(zhuǎn)移到25mL還原試劑中,輕輕振蕩5分鐘。
7.用3%乙酸溶液洗滌膠塊,然后用超純水洗滌至顯色,糖蛋白將顯現(xiàn)為品紅條帶。膠塊保存在3%乙酸溶液中。
硝化纖維素膜染色的操作步驟(注意:請在通風(fēng)櫥中進行以下操作)
1.用20mL 3%乙酸溶液洗滌膜兩次,每次輕輕振蕩10分鐘。
2.將膜轉(zhuǎn)移到10mL的氧化試劑中,輕輕振蕩15分鐘。
3.用10mL 3%乙酸溶液洗滌膜3次,每次輕輕振蕩5分鐘。
4.將膜轉(zhuǎn)移到10mL的糖蛋白染色試劑中,輕輕振蕩15分鐘。(注:若染色試劑中有晶體析出,只需離心取上清液去除晶體即可,不要加熱來溶解晶體。)
5.將膜轉(zhuǎn)移到10mL還原試劑中,輕輕振蕩5分鐘。
6.用3%乙酸溶液洗滌膜,然后用超純水洗滌至顯色,糖蛋白將顯現(xiàn)為品紅條帶。膜可保存在3%乙酸溶液中。
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關(guān)注
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